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禽流感病毒HA1基因的克隆及原核表达 总被引：2，自引：0，他引：2
用RT-PCR方法扩增出禽流感病毒A/Muscovyduck/Fujian/2/2000(MF00)株部分HA基因,大小约900bp,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行了序列的分析。通过BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点将HA基因亚克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,成功构建了阳性重组表达质粒,并将阳性重组质粒转化BL21(DE3)菌株。经IPTG诱导表达,结果禽流感HA基因在pGEX4T-3系统中得到高效表达,经Westernblotting检测证实表达产物有生物学活性。 相似文献
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国内外很多学者都在进行着传染性法氏囊(Infectious bursal disease,IBD)各种基因工程疫苗的研制,IBDV-vp2基因在多种载体中得到表达并取得了较好的保护效力。本实验室已构建了表达IBDV-vp2基因的重组马立克氏病病毒。本研究对该重组马立克氏病病毒疫苗的遗传稳定性以及对SPF鸡和含有母源抗体的商品鸡的免疫保护作用进行了评价。结果表明,103 PFU和104 PFU剂量的重组病毒免疫后对SPF鸡抗传染性法氏囊标准强毒的保护率分别为53%和73%。104 PFU剂量的重组病毒免疫后对含有母源抗体的商品鸡抗传染性法氏囊标准强毒的保护率为87%,结果显示重组疫苗具有一定的应用前景。 相似文献
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在不久的将来,能保护鸡只抵抗多数或全部疫病的多价鸡胚接种疫苗以及对鸡胚安全的重组或亚单位疫苗可能会用于家禽生产。新一代的鸡蛋接种机能最大程度地减少疫苗的浪费,因为它只给特定性别的活胚接种疫苗。鸡胚接种技术的发展也会刺激其他养禽业效仿肉鸡养殖业,使鸡胚免疫技术更普及。这种技术的商业化也许会促使其应用扩大到疫苗接种以外的领域,如性别鉴定、免疫增强剂和促生长剂的添加及鸡胚给养。 相似文献
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将生产场中含有H5亚型禽流感母源抗体的雏火鸡、雏乌鸡和注射过H5亚型禽流感疫苗并产生抗体的青年、成年火鸡与乌鸡,用H5亚型禽流感病毒(DL-602F4)进行攻毒,同时设无H5亚型禽流感抗体的火鸡、乌鸡作为对照,观察其保护情况。结果表明,火鸡与乌鸡在攻毒量约500ELD50/只情况下,雏火鸡的母源抗体HI效价必须≥1∶32,才能达到84.6%(22/26)以上的保护;育成和成年火鸡HI效价≥1∶32,有93.9%(14/15)保护;雏乌鸡的母源抗体HI效价必须≥1∶128时,才有100%(8/8)保护;育成乌鸡HI效价≥1∶16,有100%(10/10)保护;成年乌鸡HI效价≤1∶16,无一保护。火鸡和乌鸡不论体内含有由疫苗产生的抗体还是母源抗体,注射攻毒后受保护不死亡的鸡其肛、咽部均有一定比例排毒,所以说,一定水平的抗体能防止鸡群感染发病,但不能防止排毒。 相似文献
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本试验首先用RT-PCR方法扩增出H9N2亚型禽流感病的HA基因,大小约1 700 bp,将其克隆到真核表达载体pcDNA中,并将该真核表达载体上的CMV启动子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆入马立克氏病病毒US2基因中,成功的构建了马立克氏病病毒的转移载体。然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,通过蓝斑筛选获得重组病毒。该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因。免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒表达了禽流感HA蛋白,表达的HA蛋白具有血凝活性。 相似文献
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