TAIL-PCR技术及其在植物基因中的克隆     

郑岑  张立平  唐忠辉  赵昌平  苑少华 《广西农业生物科学》2009,(3):544-548

热不对称性PCR（thermal asymmetric interlaced PCR，TAIL—PCR）是一种用来分离与已知序列邻近的未知DNA序列的分子生物学技术。该技术利用3个根据已知序列设计的嵌套特异性引物分别和简并引物组合进行PCR反应，选择恰当退火温度对目标片段进行PCR扩增。TAIL-PCR技术作为一种使用技术简单易行，反应高效灵敏，产物特异性高，重复性好，能够在较短的时间内获得目标片段，已经在分子生物学研究领域广泛应用。本文从TAIL-PCR技术原理出发，对该技术特异性引物设计、随机引物组合选择、PCR反应条件等关键性问题进行综述，并介绍TAIL—PCR技术在植物基因克隆上的应用现状及发展前景。  相似文献   

玉米细胞抽提物在寡核苷酸指导的基因修复中的作用     

唐忠辉  郑用琏  张方东 《作物学报》2005,31(12):1531-1536

寡核苷酸指导的基因修复是近几年发展起来的改造生物体遗传物质的技术。为了深入研究玉米细胞抽提物在寡核苷酸指导基因修复的体外系统中的作用,本研究分别将玉米细胞抽提物介导修复的质粒分子和无细胞抽提物条件下通过变性-复性的方法形成的寡核苷酸、靶质粒的结合态分子,转入3种不同基因型的大肠杆菌菌株,研究基因修复的频率,探讨基因修复的机制。结果表明,玉米细胞抽提物可能公促进了靶质粒分子和寡核苷酸分子的配对,其后的DNA修复过程由大肠杆菌的修复系统完成。  相似文献