表达 Harpin_Ea基因的转基因马铃薯的晚疫病抗性分析   总被引：12，自引：0，他引：12  

李先平  何云昆  陈善娜  赵志坚  李树莲  李汝刚 《云南农业大学学报(自然科学版)》2002,17(3):252-257

 通过根癌农杆菌介导,用Harpin_Ea基因转化马铃薯四倍体栽培种大西洋（Atlantic）,获得107个马铃薯转化株系。经过卡那霉素的抗性鉴定和PCR分子检测,有59株PCR检测成阳性,占所有转化植株的55.14%.实验对部分转基因植株进行室内抗病性评价,从24个PCR阳性株系中筛选到9个株系的抗病性与对照相比有显著差异(P<0.05),其中7株的抗病性与对照相比差异极显著(P<0.001)。结果初步表明Harpin_Ea基因已整合到马铃薯的基因组中并得到表达,提高了植株的晚疫病抗性。  相似文献   

用于检测马铃薯X病毒株系（PVX-HB）的单克隆抗体     

李汝刚  蔡少华  刘佳  冯兰香  徐惠迪 《中国农业科学》1991,24(2):90-91

自Moretra等(1980)在南美发现PVK.HB株系以来,虽然其他地区尚未见报道,但PVX.HB打破抗性基因的特性(Jones,1985)已经引起病毒学家和育种学家的高度重视。鉴于该株系和PVX的其他株系在马铃薯上引起相似的症状,而用多克隆抗体的各种免疫学诊断方法,如ELlSA及免疫电镜等均难以将HB株系和PVX的其他株系区分开,人们寄希望于单克隆抗体能识别单一抗原决定簇的特性来解决这一难题,为建立分泌抗PVXHB株系特异性单克隆抗体杂交瘤细胞系,我们按常规免疫学方法经多次细胞融合均未能如愿(肖小文等1989)。经用PVX的其他株系对初生小鼠进  相似文献   

甘薯病毒病的研究Ⅰ甘薯羽状斑驳病毒的分离、鉴定     

李汝刚  王小凤 《植物病理学报》1992,22(4):319-322

 本文从寄主范旧,蚜传特性、病毒颗粒形态、免疫电镜等方面对嫁接获得的甘薯羽状斑驳病毒廊坊分离物(SPFMV-LF)进行了鉴定,并和SPFMV-RC(美国株)进行了实验比较。SPFMV-LF易汁液摩擦传播和嫁接传播,并以蚜虫非持久性传播,SPFMV-LF系统侵染巴西牵牛(Ipomoea setosa)、牵牛(I.nil);不侵染Chenopodium quinoa、C.ama-ranticolor、Nicotiana benthamiana及其它烟草。尚未发现其局部斑寄主。SPFMV-LF及SPFMV-RC感染I.setosa后引起相似的症状,但感染I.nil后症状差别较大。病毒颗粒长860-830nm,经两次蔗糖垫超速离心从SPFMV-LF感染的I.setosa叶片提取病毒并在BALB/C小鼠中制备抗SPFMV-LF的腹水多克隆抗体,免疫电镜表明,SPFMV-LF的抗体和SPFMV-RC株系有反应。上述实验结果表明SPFMV-LE是SPFMV的一个株系,但不同于SPFMV-RC。  相似文献   

甘薯病毒及类似病毒病害   总被引：4，自引：0，他引：4  

李汝刚  蔡少华  宋伯符 《植物保护》1992,18(2):31-32

近十年来,发现甘薯种性退化比较严重,导致块根产量降低。退化的原因除去无性变异等外,病毒及类似病毒病的危害也是重要因素之。病毒引起马铃薯退化已是众所周知,而引起甘薯退化尚未引起足够的重视。 甘薯是我国四大主要的粮食作物之一,也是食品工业、轻工业和饲料工业的重要原料。我国甘薯种植面积达8000万亩,总产约  相似文献   

Harpin蛋白基因的克隆及序列分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

李汝刚  时光春 《植物病理学报》1998,28(3):281-286

 以梨火疫病细菌基因组DNA为模板,通过合成5'-端及3'-端一对特异引物,利用多聚酶链式反应(PCR)扩增获得harpin蛋白基因。将其克隆到E.coli质粒上进行序列分析。结果表明:基因由1155个核苷酸组成,编码385个氨基酸残基组成的多肽。与发表序列相比较,核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为99.31%和98.96%。  相似文献   

马铃薯抗晚疫病遗传工程研究获得重大突破     

李汝刚 《植物保护》1997,(5)

马铃薯抗晚疫病遗传工程研究获得重大突破马铃薯晚疫病是由卵菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ（Ｍｏｎｔ．）ｄｅＢａｒｙ引起的马铃薯毁灭性病害。由于该病危害马铃薯块茎全世界年损失达１７０亿美元。据不完全统计，９０年代以来我国马铃薯因晚疫病危害年...  相似文献   

马铃薯抗晚疫病研究进展   总被引：15，自引：0，他引：15  

李汝刚  宋伯符 《马铃薯杂志》1997,11(4):243-250

  相似文献   

马铃薯抗晚疫病研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

李汝刚  伍宁丰  范云六  宋伯符 《中国马铃薯》1997,(4)

1前言晚疫病是马铃薯主要病害之一，在全球范围内绝大数栽培马铃薯的冷凉地区广泛传播。19世纪中叶，晚疫病大流行使800万以马铃薯为主食的爱尔兰人口因饥饿或移民失去1／4，进入20世纪80年代，晚疫病在世界各地马铃薯种植区的频频发生，再次引起了国际社会的极大关注。早在199  相似文献   

烟草24kD PR蛋白基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：1，他引：2  

李汝刚  伍宁丰 《农业生物技术学报》1996,4(4):329-334

烟草２４ｋＤＰＲ蛋白裂解晚疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ）孢子囊并抑制其菌丝生长，是马铃薯晚疫遗传工程所需要的核心元件，我们以烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＸａｎｘｉ－ｎｃＮＮ）基因组ＤＮＡ为模板，通过事成５′－端及３′－端的一对特异引物，利用多聚酶锭反应（ＰＣＲ）扩增到得缺失３′－端ＣＴＰＰ的２４ｋＤ蛋白基因，并克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ质粒上，序列分析表明，我们得到的２４ｋ  相似文献   

PR—1a蛋白基因的克隆及序列分析     

陈茹梅  李汝刚  伍宁丰  杨芳  孙盈盈 《农业生物技术学报》2001,9(4):319-321

以珊西烟草（Nicotina tabacum cv. Xanthi-nc）的基因组DNA为模板，通过合成一对特异性引物，利用多聚酶链式反应（PCR）扩增获得PR－1a蛋白基因。将其克隆到E.coli质粒上进行序列分析。结果表明：该基因由504个碱基组成，编码168个氨基酸。与已发表序列相比较，核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为99.9%和100％。  相似文献