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三种PCR方法诊断猪伪狂犬病的比较研究 总被引:8,自引:0,他引:8
针对伪狂犬病毒gD基因的不同片段设计三对引物,分别进行PCR扩增用于猪伪狂犬病的诊断,扩增的三个片段的长度分别为262bp、217pb以及1203bp的全基因。通过比较发现,这三种PCB诊断方法均具有很高的特异性和敏感性,值扩增gD基因内部262bp的PCR诊断方法种具有突出优点,其退火与延伸合成一步,其操作可于1h内完成,敏感性更高,更适于猪伪狂犬病的快速诊断。 相似文献
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为研究SPF鸡感染禽网状内皮组织增生症病毒(REV)后白细胞介素2(IL-2) mRNA表达的动态变化,本研究应用荧光定量RT-PCR方法,对SPF鸡感染REV后主要免疫器官的IL-2 mRNA转录水平进行了初步研究.结果显示,与对照组相比,REV感染组鸡的脾脏、胸腺和法氏囊中IL-2基因的表达量在感染后7d、14d、21d、28 d、35 d、42 d和49 d均呈现升高,而且除21日龄、28日龄鸡的脾脏外,均为差异显著(p<0.05).本研究表明REV感染后可以诱导鸡的机体表达IL-2. 相似文献
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1发病情况某专业户从某种鸡场一次性购进两品代肉仔鸡1800只,4日龄开始陆续发病,21日龄后逐渐停止发病,截止35日龄,发病率和死亡率分别为76%和41%左右。水平调查得知,其他养鸡户同一批肉鸡苗均出现同样症状;垂直调查得知,该种鸡已发病,产蛋率下降40%左右。发病后曾用维生素民、B。、E、鱼肝油、亚硝酸钠及抗生素等药物治疗,均无效果。少数自然耐过的病鸡生长迟滞或发育不良,平均体重明显低于正常水平。2临床症状病鸡初期表现精神沉郁、两眼呆滞,反应迟钝,继而出现共济失调、脚软、站立不稳,不愿走动。常以附关节着地呈犬坐… 相似文献
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断奶猪多系统衰弱综合征 (PostweaningMulti systemicWastingSyndrome ,PMWS)是由猪圆环病毒 2型 (PorcineCircovirus - 2 ,PCV - 2 )引起的一种断奶后猪以全身性消耗为主要特征的新传染病。临床上主要表现为呼吸困难、腹泻、贫血、体表淋巴结肿大及渐进性消瘦 ,病变特征为全身器官组织 ,尤其是淋巴组织的炎症变化。该病严重影响猪的生长发育 ,1 991年首先发现于加拿大西部的猪群 ,此后 ,美国、法国、西班牙、德国、英国、意大利、丹麦、荷兰、新西兰、北爱尔兰、墨西哥、… 相似文献
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为探讨重组鸡白介素18(mChIL-18)毕赤酵母工程菌在5L发酵罐中大规模发酵的工艺及其对新城疫疫苗的免疫增强作用,复苏工程菌GS115/pPIC9K-mChIL-18于YPD培养基,在其D600值达到5.2左右时转入发酵罐中,采用分批补料方式对毕赤酵母工程菌进行高密度发酵。控制和优化各种发酵条件,经历84h结束发酵。将发酵液离心,用6×His镍柱对上清中的表达产物进行纯化,并将纯化后的mChIL-18用脂质体包被后和新城疫疫苗一起对鸡群免疫。结果显示,毕赤酵母工程菌在5L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH5.5,溶氧值20%~30%,温度28℃,诱导72h,mChIL-18的表达产量为560mg/L,发酵上清经纯化后纯度可达70%以上;用0.2mL的mChIL-18脂质体能够显著增强机体的免疫力,其中HI抗体效价和淋巴细胞亚群CD4+、CD8+含量均显著高于对照组。这表明mChIL-18毕赤酵母工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,并能显著增强新城疫疫苗的免疫效果,为IL-18在生产实践得到更好的应用奠定了基础。 相似文献
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MTT法检测鸡脾脏和外周血NK细胞杀伤活性的条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
选取不同日龄的SPF鸡和肉鸡,用贴壁法从血液和脾脏分离出NK细胞作为效应细胞,选择瘤细胞MDCC-MSB1和MDCC-MSBCU147分别作为靶细胞,二者按比例混合,孵育,利用MTT法检测靶细胞的活力反映效应细胞对靶细胞的杀伤活性,并对效靶比、作用时间进行比较.结果显示,MSB-1和CU147均可作为NK细胞良好的靶细胞,但CU147更稳定;效靶比为20:1~50:1,作用时间8~16 h杀伤效果稳定;50%DMF-20%SDS混合物作为裂解液能够对结晶彻底溶解,优于其他溶解试剂. 相似文献
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以非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒(EDSV),经差速离心法纯化,电镜下观察到病毒无囊膜,大小为70~85nm。以蛋白酶K法抽提病毒基因组,琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量约34kb、背景清晰的核酸带。HindⅢ酶切EDSVDNA可见10条片段,以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法对病毒基因组的HindⅢ酶切片段进行分子克隆,获得17个重组质粒,通过酶切、斑点杂交鉴定,证实已经成功地克隆到EDSV的5.24kb、2.02kb、1.65kb、1.47kb、1.41kb等5个DNA片段。 相似文献