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以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶 总被引:1,自引:0,他引:1
用含有TaqDNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶,利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃,75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的。PCR扩增反应和SDS-PAGE分析表明所制备的Tap DNA聚合酶的纯度,活力,敏感性,特异性均达到试验要求。该方法具有快速简便的优点。 相似文献
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一组容量为5 927条烟草(Nicofiana tabacum)EST的数据(GenBank登录号为CV015900~CV021826),包含521个重叠群和3 079个独立EST.EST数据分析显示:高丰度表达基因主要涉及光合代谢、蛋白合成等植物基本的生理功能;而低丰度表达基因则占假定独立转录本(TUTs)总数的85.5%.在此基础上,制备完成cDNA阵列,并应用于盐胁迫下烟叶的基因表达谱分析,结果表明,盐胁迫即可使烟草叶片的基因表达谱发生显著改变,并涉及多个重要的植物生理过程.包括水通道蛋白PIP2a、乙烯应答蛋白酶和mRNA剪接因子prp31等42个基因的检出,为阐明植物胁迫反应的调控机制提供新的线索. 相似文献
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[目的]通过优化CTAB提取法从少量的野山参须根提取DNA,使其保持野山参形态的完整。[方法]综合比较CTAB提取法及其他3种DNA提取法,筛选出较为适合少量药材DNA的提取方法。[结果]从5 mg人参根须提取DNA,栽培参DNA浓度为200~1 000ng/μL,野山参为50~100 ng/μL,电泳可检测到清晰的条带,满足浓度和纯度的要求。[结论]该研究采用改进的高盐SDS法能从5 mg微量人参须根材料中提取高质量DNA,满足浓度和纯度的要求,可作为其他药材微量组织提取DNA的参考方法。 相似文献
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应用cDNA微阵列技术分析了水稻受白叶枯菌侵染后一对近等基因系(中早14R、9S)的防卫信号传导途径.在mRNA 水平,对检测到的相关基因(如病程相关蛋白、信号传导、转录因子等)间相互作用及信号传导途径的分析结果表明:白叶枯菌侵染下,乙烯(ET)介导的信号传导途径在防卫反应中可能起着重要作用.核基因接受信号后改变了一些防卫反应相关基因的表达水平,来应答病原物的侵入.实验结果还提示,水稻的一些基因通过表达丰度的改变对乙烯信号途径产生反馈调节. 相似文献
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国产乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂对人工感染鸡气囊炎的治疗试验 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡毒支原体感染是鸡常见的慢性呼吸道疾病(CRD)。其特征性的症状是呼吸罗音、咳嗽、气管炎、气囊炎、流泪等。鸡毒支原体发病率高,虽然单独感染引起的死亡率较低,但会引起增重迟缓和饲料利用率降低、幼雏淘汰率上升、成年母鸡产蛋率下降等;在饲养条件差或与其他疾病并发感染时,可使病 相似文献
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本文在制备完成高通量稻瘟病菌cDNA阵列的基础上,平行检测孢子受疏水性表面诱导0、2、8、20和30 h时间点的基因表达谱。结果显示:在附着胞形成的不同阶段,均存在大量的差异表达基因,显示出这一过程中基因表达网络的复杂性。其中,附着胞在成熟阶段的差异表达基因数要明显高于其诱导和形成阶段,表现在8 h、20 h时间点相近的基因表达谱至30 h时间点发生剧烈变化。这种动态的基因表达谱的分析可以为稻瘟病菌致病的分子机理研究提供有意义的信息。 相似文献
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弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,引起人兽共患疾病-弓形虫病。本文报道了一种基于PCR技术检测宠物弓形虫的方法,该方法的特点是通过检测宠物排泄物中是否存在弓形虫包囊,从而诊断宠物是否为真实的传染源。由于宠物的排泄物容易采集,避免了复杂的采样程序,方便于检测。 相似文献
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