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1.
【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104(WT)为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系(ZmIBH1-1-OE);通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理(20% PEG6000),进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs);结合DAP-seq(DNA affinity purification sequencing)分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV(integrative genomics viewer)分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T3代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T4代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性)均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology(GO)功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。 相似文献
2.
本刊讯战疫不误发展。2月21日,省林草局党组书记、局长刘宏葆及相关局领导和部门负责人,与省交通厅党组书记、厅长罗佳明一行就交通项目林草地占用审批问题进行会商。双方就拟开工3个和在建10个高速公路项目林草地手续办理、重点交通项目“十四五”期林草地使用政策、自然保护地准入审批等问题进行了沟通,初步达成五项共识:一是全面保障交通项目建设使用林草地定额;二是落实疫情防控期林草地使用政策加快推进交通项目占用林草地审批;三是交通项目原则上避开自然保护地,确实无法避让的,采取桥梁、隧道等“无害”化方式穿越;四是大力推进公路绿化景观建设,提升公路整体形象风貌;五是建立厅局会商机制,落实专门处室和人员负责对接具体交通项目,不定期磋商相关工作,解决疑难问题,重点确保国家、省重大交通项目顺利开工。 相似文献
3.
为贯彻落实中、省、市关于加强新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控工作精神,遂宁市林业局切实开展联防联控工作,对全市野生动物驯养繁殖场所进行拉网式排查,并全面实施封控隔离。同时,暂停在外开放风景名胜区、森林公园等自然保护地7处。高度重视,落实责任。在中、省、市疫情防控工作会召开会,市林业局立即启动疫情防控工作,成立了遂宁市林业局应对新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控工作领导小组,实施疫情防控值班制度。 相似文献
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2020年1月3日,广西壮族自治区林业局副局长、党组成员陆志星做客广西新闻网演播室,参加自治区政府门户网站在线访谈录播活动,向广大网民解读油茶“双千”计划主持人。今天访谈的主题是“产业台阶年年上八桂油茶富农家”。 相似文献
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一个目标的锁定意味着付出和牺牲,一个品牌的创立蕴涵着拼搏和艰辛。来自太湖湖畔的饲料业明珠——无锡正大畜禽有限公司(以下简称无锡正大)对此感受甚深。从无到有,20年一路走来,无锡正大如何成为太湖湖畔的饲料业明珠?在“2005中国饲料工业展示交易会”召开之际,本刊记者走访 相似文献
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红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落,由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰,现存量极少,代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一,导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来,通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施,培育了大面积红松阔叶混交林,其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分,现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。 相似文献