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本试验通过对10头荷斯坦奶牛在受孕前后的整合素αvβ3表达变化规律与奶牛早期妊娠关系的研究,筛选早期妊娠检测标志性因子,从而提高奶牛的繁殖效率。试验表明,选取的10头荷斯坦奶牛中有7头受孕3头未受孕,检测发现,10、13、16、19d,αv基因和β3基因转录及整合素αvβ3表达水平在受孕奶牛血液中的表达量均高于未孕奶牛,特别是输精后第16d受孕奶牛的表达量显著高于未孕奶牛。因此,αvβ3检测可将早孕检测的时间窗口提前到人工输精后第16d。 相似文献
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[目的]探究奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体及其miR-218在减轻大肠杆菌脂多糖诱发免疫反应中的作用.[方法]用不同质量浓度大肠杆菌脂多糖作用于奶牛子宫内膜上皮细胞系24 h后采用细胞计数试剂盒检测细胞活性;酶联免疫吸附测定检测免疫因子IL-1β和TNF-α释放;采用透射电子显微镜和蛋白印记法验证提取外泌体的粒径和标识蛋白CD63表达,荧光定量聚合酶链式反应法检测外泌体中miR-218表达变化;采用激光共聚焦显微镜观察外泌体与奶牛子宫内膜上皮细胞融合;细胞转染mimics 218检测其对大肠杆菌脂多糖诱发奶牛子宫内膜上皮细胞免疫因子释放的影响.[结果]100μg/mL大肠杆菌脂多糖处理奶牛子宫内膜上皮细胞后,IL-1β、TNF-α含量均显著高于对照组(P＜0.05);大肠杆菌脂多糖刺激奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体中miR-218的表达量极显著低于奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体中miR-218的表达量(P＜0.01);正常培养奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体能够与大肠杆菌脂多糖处理的奶牛子宫内膜上皮细胞融合并与NF-KB (p65)蛋白共定位于细胞质中.将奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体加入到100 μg/mL大肠杆菌脂多糖处理奶牛子宫内膜上皮细胞24 h后,显著抑制了大肠杆菌脂多糖引起的奶牛子宫内膜上皮细胞培养上清中的IL-1β和TNF-a释放(P＜0.05).同样的,转染进奶牛子宫内膜上皮细胞内mimics 218与磷酸化的NF-KB (p65)核外部分共定位并显著抑制了大肠杆菌脂多糖诱发的奶牛子宫内膜上皮细胞中TNF-α释放(P＜0.05),而对IL-1β释放无显著差异.[结论]miR-218能够随着健康子宫内膜上皮细胞分泌外泌体进入到受到大肠杆菌脂多糖刺激奶牛子宫内膜上皮细胞内,并与磷酸化p65核外部分共定位并抑制大肠杆菌脂多糖引起的TNFα的释放. 相似文献
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旨在筛选奶牛早期妊娠诊断标志因子，将奶牛早期妊娠检测时间窗口提前提供理论基础，从而提高奶牛养殖经济效益。北京某牛场选10头荷斯坦奶牛，在输精后第1、4、7、10、13、16、19天取血，通过荧光定量PCR和western blotting方法分析Wnt7a和PR的表达趋势和变化规律。通过直检对10头荷斯坦奶牛的怀孕检测，其中有7头受孕3头未受孕。通过检测受孕和未孕的奶牛血液中Wnt7a基因和PR基因的表达量，发现Wnt7a基因在受孕奶牛血液中的表达量均高于未孕奶牛，特别是输精后第7天受孕奶牛的表达量显著增高，Wnt7a的蛋白质水平表达呈现出类似趋势；PR基因在全部10头奶牛中呈现出从输精后第一天表达开始降低，并一直维持一个很低的表达状态。Wnt7a具有作为奶牛早期妊娠诊断标志因子的潜质，其优势在于将检测窗口提前到输精后的第7天；PR不具有作为标志因子的优势。通过探究影响早期妊娠的相关因子变化规律，可以为孕检的时间窗口提前到早期妊娠阶段提供理论依据。 相似文献
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[目的]为提高优质奶牛的繁殖力,保证低成本的情况下大量生产优质胚胎,对荷斯坦奶牛采用活体采卵的方式采集卵母细胞。[方法]将4头荷斯坦奶牛分为超排组和非超排组2组,超排组对试验牛注射FSH,非超排组对对照牛不采取任何处理。对荷斯坦奶牛进行活体采卵,并对卵母细胞数进行统计。[结果]共采集到12枚卵母细胞,经过受精培养后有8枚受精卵发育良好。[结论]采用优化的活体采卵程序并配合超排技术,能够更好地利用良种奶牛,以达到动物胚胎生产和辅助生殖的目的。 相似文献
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