副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞的黏附作用及其黏附模型的建立     

王津津  张彦明  汤智慧  唐青海  仝刚  郝艳阳 《西北农业学报》2010,19(6):23-28

为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)与原代培养的猪气管黏膜上皮细胞的相互作用,应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,于胶原覆盖的盖玻片上培养,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮细胞,然后以对数生长期不同Hps含量的菌液感染上皮细胞和猪脐静脉血管内皮细胞,分别作用1、2、34、h后,通过革兰氏染色法观察Hps对细胞的黏附情况。结果表明,Hps可黏附在上皮细胞和内皮细胞表面;Hps对气管上皮细胞有毒性作用,致细胞变性坏死和凋亡;Hps对细胞的黏附力与其在菌液中含量和作用时间有关,以菌落形成单位计,当含量为1.0×108mL-1且感染4 h后,黏附效果最好。高倍显微镜下可见大量Hps黏附于猪气管上皮细胞,只有个别Hps黏附于猪血管内皮细胞表面。说明Hps对猪气管黏膜上皮细胞的黏附能力远强于猪血管内皮细胞,可以利用猪气管黏膜上皮细胞建立副猪嗜血杆菌的黏附细胞模型。  相似文献   

猪细胞周期蛋白A基因的克隆及其功能研究     

范丽  唐青海  张彦明  刘伟  仝刚 《畜牧兽医学报》2010,41(4)

本研究旨在克隆猪细胞周期蛋白A基因(CyclinA),并在猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)中表达,以验证其功能。以人的CyclinA基因为信息探针,经电子克隆得到猪CyclinA基因,通过RT-PCR和DNA测序验证电子克隆结果并对其作生物信息学分析,用RT-PCR、Westernblot研究它在SUVEC中的表达情况。应用激光共聚焦显微镜分析它在细胞中的亚细胞定位,并通过流式细胞仪分析细胞周期以及用MTS法测定细胞的增殖能力。结果如下:核酸测序证明RT-PCR产物同电子克隆结果相符。该cDNA包含1299bp的完整开放阅读框(ORF),共编码432个氨基酸,经NCBIBLAST分析,该基因定位于猪的8号染色体上。Westernblot结果显示CyclinA基因编码蛋白的相对分子质量大小约为40ku,亚细胞定位研究表明该蛋白定位于细胞核中。经流式细胞仪分析表明稳定表达该基因的细胞,其G1期的细胞数量比对照组细胞增加了15%～20%,而S期的细胞数量比对照组细胞减少了约18%;MTS法检测显示细胞株SUVEC-CycAGFP的增殖活性明显高于对照组细胞。作者成功克隆到新基因猪源细胞周期蛋白A,并验证了其生物学功能,为今后开展病毒感染对猪细胞周期蛋白A影响的研究奠定了基础。  相似文献   

落叶型黄萎病在山西的发生及其防治   总被引：2，自引：0，他引：2  

吉贞芳  许爱玲  张爱莲  竹长青  曹占红  仝刚山  樊立强 《中国棉花》2002,29(11):37-38

落叶型黄萎病是棉花中期发生的重要病害,也是国内外的检疫对象.这个类型的病害致病性很强,现已成为阻碍我国棉花生产发展的重要障碍.近几年来,北方棉区也有发生.为尽快的摸清落叶型黄萎病在山西省的发生和危害,及早采取针对性的防治措施,于2000～2001年进行了定株观察、摸底调查及防治试验.  相似文献   

改革给原(良)种场带来生机     

仝刚山  姜俊玲 《种子科技》1990,(3)

运城地区位于山西省西南部,是全省粮棉主要产区。所辖13个县(市)原(良)种场,由于过去管理体系的“大锅饭”,多数场连人员工资也发不了,一直是农业部门的沉重包袱。  相似文献