逆转录环介导等温扩增技术检测草莓潜隐环斑病毒的研究     

张吉红  余澍琼  徐瑛  张慧丽  陈先锋  陈剑平  陈炯 《植物保护》2013,39(6):74-77

采用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）,建立了草莓潜隐环斑病毒（Strawberry latent ringspot virus, SLRSV）检测方法。根据SLRSV外壳蛋白编码基因上的8个位点,共设计了6条引物,通过逆转录环介导等温扩增得到特征性的瀑布状条带。特异性试验表明,引物对SLRSV的检测具有良好的特异性;灵敏度试验显示RT-LAMP的灵敏度比普通RT-PCR高出100倍。该方法无需特殊的试剂和设备,只需在水浴锅中65 ℃等温扩增,整个检测周期约1.5 h,结果采用SYBR green I染色显示,易于观察和判定。  相似文献   

南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测试剂盒的研制   总被引：2，自引：2，他引：0  

陈先锋  张吉红  崔俊霞  张慧丽  郭立新  余澍琼 《植物保护学报》2013,40(2):189-190

南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)是我国对外公布的检疫性有害生物,其寄主广泛,极易传播、蔓延[1],因此,加强对该病毒的检测具有重要的意义.目前,针对ArMV的检测方法主要有DAS-ELISA和RT-PCR技术[2].这两种方法在检测周期方面具有明显的优势,且操作简单,但对仪器的依赖性较强.环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新颖的核酸扩增方法,具有检测速度快、周期短、操作简单和灵敏度高等优点,同时LAMP无需特殊的仪器.本试验对ArMV的LAMP检测试剂盒进行了研制.  相似文献   

百合无症病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立     

余澍琼  陈先锋  张吉红  于翠  张慧丽  闻伟刚 《浙江农业学报》2014,(1)

百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳性样品,均能够得到典型扩增曲线,而在百合斑驳病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒等其他病毒阳性样品中没有典型的扩增曲线,表明了该方法的特异性。与普通RTPCR法相比,此方法灵敏度提高10倍。应用该方法,2012年6月至今,宁波出入境检验检疫局从荷兰进境的67批百合种球样品中检出53批百合无症病毒阳性,检出率为93%。  相似文献   

实证图书馆学研究方法在馆藏质量评价的应用     

张敏娟  余澍 《农业图书情报学刊》2011,23(8):75-79

应用用户—系统交互实证图书馆学方法,对宁夏医科大学图书馆2008—2010年中文中图馆藏文献的分类类目百分比,2010年中文中图馆藏文献藏书比率、文献资源利用率、符合程度等指标进行统计分析,通过数据真实评价本馆馆藏质量,并阐述了用户—系统交互实证图书馆学方法对馆藏建设的指导意义。  相似文献