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采用Nano–LC–ESI–MS/MS蛋白鉴定技术对湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行质谱分析,应用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对尖吻蝮蛇蛇毒LD_(50)进行测定。结果显示:尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子质量集中在1.0×10~4～2.0×10~4(46.9%)、4.0×10~4～5.0×10~4(22.4%)、2.0×10~4～3.0×10~4(10.6%)和7.0×10~4～8.0×10~4(7.6%),其中代表性的高丰度蛋白有蛇毒金属蛋白酶A(11.7%)、蛇毒金属蛋白酶H1(9.8%)、蕲蛇类凝血酶–2(7.3%)、抗凝血酶A–A亚基(6.8%),低丰度蛋白(0.1%)有Ecto–5'–核苷酸酶、碱性磷脂酶A2 DAV–N6、生长分化因子11;蛇毒引起红细胞溶血的最低质量浓度为60.00μg/mL,尖吻蝮蛇蛇毒对KM小鼠的LD_(50)为7.1796mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安、注射部位出现奇特瘙痒和大面积溃烂,至死亡。 相似文献
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为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×102～4.69×109copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×102copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。 相似文献
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实验通过将副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)P5基因克隆至pET-28a(+)中,构建pET-OMP5原核表达质粒,再将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),通过IPTG诱导重组菌,SDS-PAGE显示pET-OMP5重组表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,Western-blot表明融合蛋白能被阳性血清识别。昆明小鼠试验结果表明OMP5重组蛋白具有一定的诱导免疫保护反应的能力。 相似文献
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对湖南地区某奶牛场隐性乳房炎发病牛病原菌感染和耐药情况进行分析.对该牛场连续5次送检的乳样进行分离纯化培养、16sRNA PCR测序、药敏试验以及耐药基因检测.结果显示:共分离出链球菌8株.基因测序鉴定显示乳房链球菌4株、停乳链球菌2株、A群链球菌2株;药敏试验显示8株链球菌对氨苄西林、头孢拉定、万古霉素高度敏感,对阿奇霉素、四环素中度敏感,对诺氟沙星、庆大霉素、链霉素不敏感;耐药基因检测显示大环内酯类耐药基因ermB、喹诺酮类耐药基因gyrA、ParC检出率最高,与细菌耐药谱相关性不强. 相似文献
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永州是养殖大市,生猪与家禽存栏量均排在湖南省前列,但山羊养殖行业却较为落后。因为永州没有发达的种植业来支撑山羊每日的粗饲料供给,所以在永州想实现山羊的大规模圈养是很难做到的;也没有类似草原的大型牧场可提供放牧,想发展以放牧为主的饲养模式也是比较艰难的。目前,永州山羊养殖以农村散养户家庭养殖为主,许多因素都阻碍了山羊养殖的发展。 相似文献
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2016年5月,永州市零陵区某规模化猪场的保育猪出现跛行,呼吸困难,部分猪只出现死亡,经流行病学调查、临床症状、 病例剖检以及实验室检测,诊断为副猪嗜血杆菌病.根据药敏试验结果,针对性用药,并结合综合防治措施,使病情得到有效控制.笔者将本次病例进行系统分析、 总结,以期更好地指导养殖户开展诊治工作. 相似文献
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消毒灭源是养殖生产中防止动物发生疫病的重要措施,因此,需要合理选择和使用消毒剂来确保消毒效率,提高畜禽场生物安全和动物福利.为了探讨过硫酸氢钾复合粉对细菌的杀灭效果的影响,以本实验室鉴定的奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌为受试菌,采用悬菌液定量杀灭试验,研究不同温度、作用时间对过硫酸氢钾复合粉杀菌效果的影响.结果显示,过硫酸氢钾复合粉浓度在1∶400、1∶800、1∶1600,4℃、20℃、30℃,5min作用下均能有效杀灭奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌,1min作用下杀灭率分别为98.6％、95.5％、92％;各种浓度组温度在4℃～30℃度和规定时间下,随着温度的上升杀灭率均有不同程度的提高.研究表明,提高消毒时间和温度有助于过硫酸氢钾复合粉对金黄色葡萄球菌的杀灭效果. 相似文献
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为应对非洲猪瘟疫情,各猪场都不同程度的调整了防疫措施,适时简化了免疫程序,为评估这种调整对猪场整体保护水平的影响,通过ELISA方法,检测了 2017年至2021年猪场送检血清样品的猪瘟免疫抗体,通过按经产母猪群、后备猪群和保育猪群阶段分类,比较各年度猪群猪瘟抗体的整体水平,分析结果显示,经产母猪群在2019年的猪瘟抗体的阳性率、合格率及平均阻断率均处于一个最低值,而根据湖南当地疫情,2019年湖南当地非洲猪瘟正处于暴发期,另外,后备猪群和保育猪群的猪瘟抗体整体水平各年度间差不大. 相似文献