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为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法。采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好。对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50·100μL-1,BPIV-3可达10 TCID50·100μL-1。应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3。表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BPIV-3的临床检测。 相似文献
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根据NDVLaSota株F基因已知的抗原表位,对F蛋白进行分段表达。应用RT—PCR方法分段扩增F基因,并将其克隆到pET30a（＋））原核表达载体上,得到重组质粒pET30-F780和pET30-F760,将质粒导人BL21（ED3）感受态中,经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白通过SDS—PAGE和Westem—blotting方法进行鉴定。表达的两段蛋白大小约为31．1kDa和27．9kDa,与预期的蛋白分子量大小相符。Westernblot分析表明重组蛋白可以和NDV抗体发生特异性反应。成功构建了原核表达质粒pET -F780和pET—F760并获得了高效表达,通过Westernblot分析表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。 相似文献
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正禽流感是由A型流感病毒引起的禽类一种急性传染病,以高热、呼吸困难、全身败血症等为主要特征,具有较高的死亡率。冬季为禽流感高发期,加之春节将至,市场活禽需求量大、跨区域调运频繁,进一步加大了该病的防控难度。1禽流感流行现状禽流感按致病性的不同可分为高致病性、低致病性和非致病性3大类。非致病性禽流感仅使感染的禽体内产生病毒抗体,并没有明显临床症状。低致病性禽流感可使禽出现轻 相似文献
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正冬季气温较低,各种病毒、细菌比较活跃并能长期存活,因而极易引发禽类各种呼吸道疾病。常见禽呼吸道疾病在临床上易造成混淆,如何对病因、病症进行快速鉴别诊断,是防治该类疾病的重点。现将不同禽呼吸道疾病病症的诊断要点简述如下。1禽流行性感冒该病是由A型流感病毒引起的禽传染病,一年四季均可发生,但以晚秋和冬春寒冷季节高发,且易造成大群感染。根据 相似文献
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用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法.该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg·mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5 μg·mL-1,样品反应时间60 mi... 相似文献
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