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采集25~28日龄的五指山小型猪(WZSP)胚胎原始生殖嵴细胞(PGCs),用于 WZSP生殖细胞(EG)建系培养技术研究。研究发现:以DMEM含15%胎牛血清、0 1 mol/L巯基乙醇等为基础培养液,分别添加生长因子20 ng/mL LIF、40 ng/mL hSCF、20 ng/mL hbFGF,以STO为饲养层,进行 EG培养建系,WZSP 3 d 可出现克隆,其克隆具有出现早,生长数量多,增殖快,成熟亦早,传代率高的特点。培养 7~10 d需传代或冷冻保存。EG类细胞冷冻、解冻后尚可复苏,并传至11代。若基础培养液不添加生长因子,培养 6~10 d后亦可出现 EG克隆细胞株,但其克隆具有出现晚、数量少、增殖慢等特点。研究中还发现25~26日龄的WZSP胚胎的原始生殖嵴小、不易观察、PGCs分离较困难; 27 ~ 28 日龄的 WZSP 胚胎的原始生殖嵴体积大、易观察、便于分离并可获得多量的PGCs。同时对PGCs进行了形态学、体外分化、AKP染色鉴定等研究。2002 年 9-12 月,在中国农业科学院畜牧研究所五指山猪保种场先后从22头超排处理的大白猪供体中,于配种后(当天为 0 d)5 5~7 d实施手术法获得252枚可用胚。将123枚胚胎显微注射WZSP的EG细胞,每枚注射5~15个细胞,与未注射的 103 枚混合分别移植给9头受体,平均每头受体移植胚胎25 11±5 11枚、含注射 EG细胞胚胎 13 67±3 57 枚,其中 7 头分别 相似文献
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小型猪超数排卵与早期胚胎的手术回收 总被引：7，自引：0，他引：7
采用手术法从贵州小香猪、广西小型猪、西双版纳小耳猪和五指山小型猪子宫内回收早期胚胎 ,结果 4个品种小型猪的胚胎回收率分别为 79 6 %、77 5 %、79 3 %和 80 8% ;头均采卵数分别为 5 5± 2 5、5 6± 1 8、3 8± 1 2和 7 0± 1 0 ,各组间无显著差异。分别用PMSG +hCG法和PMSG +PG +hCG法对小型猪进行超数排卵 ,结果表明PMSG +PG +hCG法的头均排卵数 (12 2± 4 9)明显高于PMSG +hCG法 (2 0± 5 3 ,P <0 0 5 ) 相似文献
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