油柿下胚轴培养再生植株     

谢启鑫  庄东红  吴奕恒 《中国农业科学》2006,39(11):2396-2396

试验于2004～2006在广东省汕头大学生物系遗传实验室进行。供试油柿幼果6月中旬采自汕头市澄海区栽培的成年油柿树。切取油柿幼果种子，用70%酒精表面消毒30 s，0.1%升汞浸泡15 min，无菌水冲洗6次。切开种子，取出幼胚，切除胚根、胚芽和子叶，将胚轴横切几处伤口后接种于预先配好的培养基上培养。分别以MS、1/2MS、MS（1/2N）为基础培养基，添加0.05 mg•L-1IAA和2.0 mg•L-1 ZT，将胚轴接种于培养基上培养，试验基础培养基种类对不定芽再生的影响。以MS（1/2N）为基础培养基，附加不同浓度的IAA（0.01、0.05、0.1 mg•L-1）和ZT（0.5、2.0、5.0 mg•L-1），确定不同浓度的激素组合对不定芽再生的影响。以1/2MS为基础培养基，添加0.1 mg•L-1 IAA和不同浓度的ZT（0.5、2.0、5.0 mg•L-1）和BA（2.0 、5.0、10.0 mg•L-1），试验不同种类和浓度的细胞分裂素对胚轴不定芽再生的影响。培养8周后统计再生结果。所有培养基均添加0.8%琼脂、3%蔗糖和500 mg•L-1PVP，pH调至5.8后于121℃高温灭菌15 min（下同）。培养物置于28℃、光周期为12 h、光照度为60 µmol•m-2•s-1的条件下培养。 用两种方法诱导生根：一种是把再生芽基部浸入250 mg•L-1 IBA溶液中不同时间（15、30、45 s）后接种于无激素的MS(1/2N)培养基；另一种是切取再生芽直接接种于单独或组合添加了IAA（0、0.25、0.5、1.0 mg•L-1）、IBA（0、0.25、0.5、1.0 mg•L-1）、NAA（0、0.5 mg•L-1）的MS（1/2N）培养基。先暗培养9 d再移至光照下培养。 结果表明，外植体接种后逐渐从乳白色转为暗黄色，2周左右即有褐色、致密的愈伤组织形成，3周后开始出现绿色芽点。大部分不定芽形成于胚轴基部的伤口末端和侧面，而顶部较少，单个外植体最多可再生17个不定芽。试验的3种基础培养基中，MS（1/2N）效果最好，其愈伤形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别为100%、48.3%和4.3个；MS培养基效果最差，各指标分别为90.4%、22.4%和3.5个；1/2MS的效果居于前两者之间。 在不同浓度的IAA与ZT组合中，IAA 0.1 mg•L-1与ZT 2.0 mg•L-1组合的愈伤形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别达到100%、81.7%和5.3个，均显著高于其它组合。ZT浓度较高（大于2.0 mg•L-1）时再生率均超过40%，随着IAA浓度的增加，形成的愈伤组织也增加。ZT诱导不定芽的效果明显好于BA，BA浓度从2.0 mg•L-1升高到10.0 mg•L-1，不定芽再生率和平均不定芽数分别从20.5%和2.2个下降到0。 试验结果显示，用250 mg•L-1IBA浸泡基部30 s和45 s时生根最快，第7天即有不定根出现，但形成的不定根较细，植株生长缓慢。添加了不同浓度、不同种类生长素的培养基中，以IAA和IBA各0.5 mg•L-1的组合，再生苗生根较快，生根率和平均根数分别达到100%和3.2条，且愈伤少、侧根多、植株生长快且健壮，移栽后易成活，为本试验中的最佳组合。再生植株经炼苗后移栽，30 d时成活率达96.2%。  相似文献   

油柿下胚轴再生植株的培养     

谢启鑫  庄东红  吴奕恒 《果树学报》2007,24(2):157-161,F0003

以油柿下胚轴为材料进行了不定芽再生和再生苗生根的研究,旨在建立油柿的离体再生体系,为转基因操作奠定基础。结果表明,在所试验的所有培养基中,MS(1/2N)+IAA0.1mg/L+ZT2.0mg/L最适合油柿下胚轴培养,其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为81.7%和(5.3±2.1)个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上生根效果最好,生根率达100%,平均根数达(3.2±1.4)条,平均根长度为(2.4±1.0)cm,且侧根较多、植株生长迅速而健壮。再生苗生根后移栽,30d时成活率达96%。  相似文献