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【目的】探明家蝇β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase, BG)在家蝇体内的功能,为深入研究家蝇BG在木质纤维素降解中的作用奠定基础。【方法】针对家蝇BG基因的功能结构域设计3对特异性引物用于dsRNA的体外合成,通过显微注射的方法将dsRNA导入家蝇2龄幼虫,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测抑制效率,分别以滤纸、水杨苷、微晶纤维素及羧甲基纤维素钠为底物检测BG基因的干扰对家蝇消化道粗酶液滤纸酶活性、BG、CBH(Cellobiohydrolase)及EG(Endoglucanase)酶活性的影响。【结果】在注射dsRNA后18 h家蝇幼虫消化道中BG基因的表达量下降62%且此时为最佳干扰时间点,在BG基因表达受到抑制后家蝇消化道的滤纸酶、BG酶活性显著降低,且时间变化趋势与上述干扰条件下BG基因表达量变化一致,均在干扰后18 h酶活性达最低,但CBH及EG酶活性较对照组无显著变化。【结论】RNA干扰技术能够有效抑制家蝇BG基因的表达,推测家蝇BG具有滤纸酶和BG酶活性。 相似文献
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[目的]研究家蝇幼虫生态处理后猪粪、鸡粪中微生物(细菌、真菌、放线菌)数量的变化情况。[方法]猪粪、鸡粪经家蝇幼虫生态处理后,采用稀释平板计数法对样品中细菌、真菌及放线菌数量进行分析,设立未经幼虫处理的猪粪、鸡粪为对照。[结果]正常对照组猪粪在恒温、恒湿条件下放置3~5 d后,细菌、真菌及放线菌的数量达到最高峰,分别为1 378×109、3 352.0×106和3 48.81×107cfu/g。经家蝇幼虫处理后,猪粪中的各类菌数量增加幅度均较小,第5天相应的各类菌落数为158.40×109、185.0×106和4.6×107cfu/g,总体上呈较为平稳态势。正常对照组的鸡粪前5 d 3种微生物数量增加亦明显,而家蝇幼虫处理组变化均不大。[结论]家蝇幼虫处理猪粪、鸡粪后,能显著降低粪便中细菌、真菌、放线菌的数量。 相似文献
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以诱导表达方式制备的新型昆虫源抗菌肽(AMP-17)为研究对象,采用平板扩散法和倍比稀释法测定其对多株食品腐败微生物的抑菌活性,将200 μg·mL-1山梨酸钾、50 μg·mL-1和100 μg·mL-1的抗菌肽AMP-17喷淋后的草莓4℃冰箱中贮藏,研究草莓贮藏期间品质指标和理化指标,以期为草莓的防腐保鲜提供参考依据.结果 表明:抗菌肽AMP-17对黑曲霉菌、黄曲霉菌等真菌的MIC值(最低抑菌浓度)为50 μg·mL-1,MBC值(最低杀菌浓度)为100 μg·mL-1,对细菌抑制作用不明显.在4℃贮藏条件下,50 μg·mL-1和100 μg·mL-1的抗菌肽AMP-17可显著降低由于真菌污染导致的草莓腐烂,延缓草莓维生素C含量、可滴定酸含量的降低,同时能够抑制草莓总糖含量的升高,在色泽、外观以及气味等感官指标评分显著(P＜0.05)高于200 μg·mL-1山梨酸钾处理组和空白组. 相似文献
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修江帆魏川川尚小丽国果吴沁怡吴建伟 《广东农业科学》2014,41(10):152-154
从构建的家蝇幼虫cDNA 质粒文库中筛选到羧肽酶（Carboxypeptidase、CP）基因、以该基因的cDNA 文库
质粒为模板、通过PCR 扩增、获得CP 基因完整编码序列（登录号;KF939629.1）。运用生物信息学方法对该基因及其
编码蛋白的基本理化性质尧信号肽和亚细胞定位等进行预测和分析。构建PEASY-E1-CP 重组质粒、转化到大肠杆菌
OrigamiB (DE3)中进行诱导表达。研究结果表明、CP 基因ORF 全长1 284 bp、编码428 个氨基酸、理论分子量47.8
ku、等电点为6.10、具有CP 家族的蛋白保守结构域;重组原核质粒pEASY-E1-CP 经IPTG 诱导、蛋白在大肠杆菌中
获得表达。 相似文献
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[目的]了解不同培养基和储存条件对家蝇幼虫分泌物中溶菌酶含量的影响。[方法]分别以猪粪和鸡粪为培养基饲养家蝇幼虫,分别为猪粪处理组和鸡粪处理组,用麦麸饲养幼虫为正常对照组,麦麸中添加大肠杆菌菌液饲养幼虫为诱导对照组,分别提取各组2龄和3龄家蝇幼虫的分泌物,使用试剂盒检测分泌物中溶菌酶含量;分别提取正常对照组和诱导对照组中3龄幼虫的分泌物,测定在室温、4℃和-20℃下不同时间溶菌酶含量的变化。[结果]猪粪处理组、鸡粪处理组、正常对照组和诱导对照组中分离的3龄幼虫分泌物中溶菌酶的平均含量分别为2.462、2.782、1.019、2.117μg/m L,均显著高于2龄幼虫(P0.05)。猪粪处理组、鸡粪处理组和诱导对照组2龄和3龄幼虫分泌物的溶菌酶含量均高于正常对照组(P0.05)。在室温下,正常对照组和诱导对照组中溶菌酶的活性均仅能维持14 d左右;在-20℃下,溶菌酶的活性均可维持70 d左右;在4℃下,正常对照组和诱导对照组中溶菌酶活性的维持时间介于室温和-20℃之间,且2组间溶菌酶含量随时间的变化规律有一定差异。[结论]3龄蝇蛆分泌物中溶菌酶含量高于2龄蝇蛆;鸡粪培养基和猪粪培养基能显著增强家蝇2龄和3龄幼虫分泌物中溶菌酶含量;在-20℃储存条件下,家蝇溶菌酶可在较长时间内保持较高的活性。 相似文献
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国果 《农产品加工．学刊》2014,(6):20-21
<正>今年4月份以来,受强冷空气入侵的影响,中国西北地区新疆、甘肃、宁夏以及陕北榆林地区都出现了大幅度的降温以及雨雪天气。由于4月份正值苹果的开花期,预计2014年的苹果产量将会受到不同程度的影响,进而可能对西北部地区的浓缩苹果汁生产造成影响,其中以新疆伊犁地区和陕北榆林地区的受灾最为严重。1.来自中国果汁网的调查(1)新疆伊犁地区受灾情况由乌拉尔山南下 相似文献
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