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建立猪血浆中烯丙孕素含量的UPLC-MS/MS测定法。血浆中烯丙孕素以液液萃取法提取,采用Inertsil C4(3.0×150mm,5μm)色谱柱和梯度洗脱对待测样品中各成分进行分离,三重四级杆质谱仪的多重反应监测(MRM)模式进行定量分析,内标法定量。流动相A为5mmol/L甲酸铵水溶液,B为乙腈,流速为0.4mL/min,进样量为10μL。建立的烯丙孕素检测方法在1ng/mL~100ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999 2。烯丙孕素3个空白血浆添加浓度样品(1、50、100ng/mL)的批间回收率分别为93.1%±3.98%、92.7%±5.75%、88.9%±3.69%,日内变异系数分别为3.50%~14.35%、3.43%~6.20%和2.88%%~4.15%,日间变异系数在5.11%~8.86%之间。方法的检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.5ng/mL和1ng/mL。基质效应对烯丙孕素的含量测定有增强作用,烯丙孕素在低浓度(1ng/mL)为114.65%,中浓度(50ng/mL)为109.23%,高浓度(100ng/mL)为113.59%。待测样品预处理后在样品室(4℃)放置8h的时间内,低、中、高3个添加浓度水平的变异系数均小于11%,表明药物在样品室测定期间有较高的稳定性。将样品反复冻融3次后,低、中、高3个浓度添加水平的变异系数均小于9%,表明血浆样品中烯丙孕素经3个循环冻融后仍可保持较高的稳定性。该方法可用于准确检测猪血浆中烯丙孕素的含量。 相似文献
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本试验将24头达到性成熟的苏姜母猪随机分为4组,每组6头,采用多剂量水平给药进行靶动物安全性研究,其中受试药物设最大推荐剂量每头动物每日20mg烯丙孕素(相当于每次5ml)、2倍最大推荐剂量每头动物每日40mg烯丙孕素(相当于每次10ml)和3倍最大推荐剂量每头动物每日60mg烯丙孕素(相当于每次15ml)三个剂量组;另设一空白对照组,每头动物每日15ml洁净自来水,体积相当于3倍受试药推荐剂量的体积。通过一般临床观察、各组动物体重、血液学和血液生化学参数等指标及组织病理学检测或观察,评价烯丙孕素在临床用药的安全性。结果表明,试验期间各组猪均未死亡且健康良好,期间临床表现正常,3倍最大推荐剂量组剖检动物各组织器官未发现病理变化。在血液生理指标及生化指标方面,推荐剂量组、2倍推荐剂量组、3倍最大推荐剂量组与空白对照组相比,除少部分指标外,其它各指标并无显著差异。试验结果说明,宁波第二激素厂生产的烯丙孕素在推荐剂量下使用在靶动物猪上具有较高的安全性。 相似文献
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