自杀性DNA疫苗     

孙世琪  郭慧琛  谢庆阁 《中国兽医学报》2007,27(1):142-144

基因疫苗与传统疫苗相比,具有许多优势:比较稳定,便于保存和运输;将抗原以天然的形式提供给免疫系统,可同时引起全面的体液免疫和细胞免疫应答;对不同亚型的病原体有交叉抵抗作用,没有减毒活疫苗毒力回复的危险性等。基因疫苗一出现,就受到普遍关注,迅速成为疫苗研究领域的一大  相似文献   

猪水疱病病毒致病和免疫的分子基础     

孙世琪  郭慧琛  刘湘涛  谢庆阁 《畜牧市场》2009,(11):23-25

猪水泡病病毒（Swinevesiculardiseasevirus，SVDV）属于小RNA病毒科（Picornaviriclae）肠道病毒属（Enterovirus），其抗原特性与柯萨奇病毒B5（CoxsackievirusB5，CVB5）关系密切，被认为是CVB5的一个猪变种或亚种。SVDV只有一个血清型，但对其分离株进行系统发生分析可进一步分为4个抗原群或基因群。  相似文献   

猪瘟病毒E2基因与报告基因lacZ双表达质粒的构建及体外表达     

冯霞刘湘涛  孙世琪尹双辉尚佑军  刘在新谢庆阁 《中国兽医科技》2005,35(5):363-367

利用反转录和套式PCR技术，从猪瘟病毒(CSFV)石门血毒中扩增出了E2基因，将其用N0tⅠ和XhoⅠ双酶切后，与同样处理的真核表达载体pBudCE4．1相连，获得了pBudCE Es2-22的阳性质粒。对后者再以HindⅢ和XbaⅠ双酶切，并与来自质粒pBudCE lacZ／CAT的lacZ基因片段连接，获得了含CSFV E2基因与lacZ报告基因的真核双表达质粒pBudCE lacZ／Es2—22。该质粒转染BHK21细胞后，用β-Gal Staining试剂盒原位染色可见许多着染蓝色的细胞；用CSFV Antigen试剂盒检测转染细胞的上清液和细胞沉淀，均可检测到含CSFV E2抗原。结果表明，构建的真核质粒pBudCE lacZ／Es2—22实现了2个外源基因的共表达。  相似文献   

超小氧化石墨烯-氧化铁纳米粒子复合材料的可控制备及磁共振成像研究     

王海明  曹玉华  闫丹  马宇飞  张智军  孙世琪  郭慧琛 《安徽农业科学》2013,(34)

利用超小氧化石墨烯(UGO)作为载体,一步法合成水溶性的超顺磁性氧化铁纳米粒子(UGO-SPIO)。然后利用BSA修饰UGOSPIO,形成具有良好生理稳定性和生物相容性的磁性复合材料(UGO-SPIO@BSA)。普鲁士蓝染色试验及磁共振成像试验显示,UGOSPIO@BSA能很好的标记细胞,而且复合物具有良好的MR成像能力。  相似文献   

兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

贺佳慧  白满元  郭慧琛  孙世琪  张小丽  马小军 《动物医学进展》2019,(1):20-24

为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。  相似文献   

O型口蹄疫病毒样颗粒编码基因的真核表达载体构建及表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

李淑萍  孙世琪  莫亚霞  胡永浩  郭慧琛 《动物医学进展》2019,40(1):1-6

为了构建O型口蹄疫病毒(FMDV)病毒样颗粒编码基因的真核表达载体,将FMDV结构蛋白VP0、VP1、VP3的基因分别克隆到真核表达载体pVAX1中,再分别通过带有BsmBⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,分别对重组质粒pVAX-VP0、pVAX-VP1和pVAX-VP3扩增后进行酶切,用T4连接酶连接得到重组的真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3。对重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3进行PCR鉴定并测序。用脂质体将重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3转染BHK-21细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)及Western blot检测重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3在细胞中的表达情况。结果表明,成功构建了重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3,并在BHK-21细胞中得到表达。  相似文献   

不同佐剂对口蹄疫病毒样颗粒疫苗免疫效果的评价     

王翱飞  滕志东  罗新  柳海云  董虎  白满元  孙世琪  郭慧琛  张小丽 《中国兽医学报》2023,(12):2439-2444

口蹄疫(foot-and-mouth disease, FMD)是一种高度传染性疾病，严重影响着畜牧业的发展。近年来，病毒样颗粒(virus-like particles, VLPs)疫苗因具有安全、高效等优点，成为当前FMD疫苗研究热点。为解决FMDV VLPs疫苗免疫原性弱的问题，本研究选取CpG、GM-CSF和FliB佐剂，与ISA206联合后分别与FMDV VLPs配伍，免疫豚鼠后通过检测豚鼠特异性抗体、中和抗体、脾淋巴细胞增殖能力及FMDV的攻毒保护率，探究其对FMDV VLPs疫苗的免疫增强效果。结果表明，CpG与ISA206联合作为佐剂可有效地刺激机体产生更高水平的特异性抗体和中和抗体，同时能够提高动物的攻毒保护率，从而增强了FMDV VLPs疫苗的免疫效力，研究结果为FMDV VLPs疫苗及其他蛋白质类疫苗最优佐剂的选择提供了依据。  相似文献   

猪瘟流行毒株的致病性研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

孙世琪  王雯慧等 《中国兽医科技》2001,31(1):3-5

以３株猪瘟流行野毒（ＧＳＬＴ、ＧＳＬＸ、ＮＸＹＣ）人工感染健康猪，对其致病性进行了比较研究，结果表明，ＮＸＹＣ、ＧＳＬＸ、ＧＳＬＴ为中等毒力的毒株，均具有致病性，可引起亚急性型或慢性型猪瘟；３株猪瘟流行毒可引起猪组织和器官发生病变，其中脑（小脑、大脑）、免疫器官（牌、淋巴结、扁桃体）和肾为其主要靶器官；３株野毒所致病理组织学变化的特征是小脑与大脑的非化脓性脑膜脑炎，增生性肾小球肾炎，免疫器官出现增生与坏死，小血管内皮增生，多种组织器官有淋巴细胞和嗜酸性白细胞浸润。  相似文献   

重组猪瘟病毒E2基因逆转录病毒载体的构建及其表达活性   总被引：4，自引：0，他引：4  

田宏  刘湘涛  林彤  吴锦艳  龚真莉  郑海学  代兴国  孙世琪  尚佑军  谢庆阁  张彦明 《中国兽医学报》2007,27(4):460-463

从实验感染兔脾组织中提取总RNA，应用RT—PCR得到了CSFVC-株结构蛋白E2基因，定向克隆于逆转录病毒载体pBABEpuro，经PCR、酶切和序列分析鉴定，获取阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒载pVSV—G共转染GP2—293细胞，收获假型病毒，并在Polybrene的介导下感染PK15细胞，嘌呤霉素筛选表达猪瘟E2基因的细胞株。通过细胞传代并结合PCR、免疫荧光及ELISA检测表明，所筛的细胞细胞系能稳定表达猪瘟E2基因，而且表达产物具有良好的生物学活性。  相似文献   

猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究   总被引：1，自引：1，他引：1  

孙世琪  郭慧琛  尹双辉  冯霞  尚佑军  代兴国  刘在新  刘湘涛  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2006,37(10):1016-1020

利用RT—PCR技术，用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因，克隆于DNA复制子载体pSCAl中，获得重组质粒pSCA／1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞，RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示，猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明，自杀性DNA疫苗pSCA／1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。  相似文献