猪流行性腹泻病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜艳平  姜新鹏  孙刘妹  赵广宇  崔文  唐丽杰  乔薪瑗  李一经 《中国预防兽医学报》2015,(2):119-122

为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的重组N蛋白作为检测抗原,优化ELISA反应条件,建立了PEDV间接ELISA抗体检测方法。该方法仅对PEDV血清检测为阳性,对猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒感染猪的阳性血清检测结果均为阴性;其批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。采用建立的ELISA方法检测了130份临床样品,其中78份血清样品为PEDV抗体阳性。表明建立的以重组N蛋白为包被抗原检测PEDV血清抗体的方法可以用于检测PEDV感染及相关的流行病学调查。  相似文献   

猪轮状病毒DN30209株VP4全长蛋白表达及多抗制备和鉴定     

任晓峰  窦秀静  郝雅环  孙刘妹  魏小宁 《东北农业大学学报》2014,(12)

为开展猪轮状病毒（PRV）及其VP4蛋白相关特性研究,参照GenBank所收录的猪轮状病毒JL94、OSU等株序列设计一对特异性引物,从实验室分离鉴定的猪轮状病毒DN30209株扩增约2330 bp VP4全长基因,并成功构建重组质粒VP4-pMD18-T。重组质粒经测序、序列比对及分析。结果表明,DN30209株VP4全基因长2331 bp,与参考株JL94的核苷酸同源性为99.7%,氨基酸同源性为99.5%。将VP4基因连接到pGEX-6P-1原核表达载体中,构建并筛选出阳性原核表达载体重组质粒VP4-pGEX-6P-1。阳性重组质粒转化Rosetta宿主菌感受态细胞中,经IPTG诱导,获得以包涵体形式表达的重组蛋白,融合蛋白大小约为112 ku,与预期大小相符。回收、纯化并复性该蛋白,将其作为免疫原免疫大白兔,制备兔抗PRV VP4全长蛋白多克隆抗体,间接ELISA测定多抗效价到1??105,间接免疫荧光（IFA）和免疫印迹（Western blot）检测表明该多抗均可与PRV具有很好的抗原抗体反应性,为猪轮状病毒研究提供有效实验材料。  相似文献   

舒泰复合赛拉嗪和强痛灵对猫呼吸功能的影响     

邹晶  蔺东启  孙刘妹  刁洪秀  孙思超  马海鹍  范宏刚 《中国兽医杂志》2013,49(4)

猫是世界上最受喜爱的宠物之一,也是研究中枢神经系统功能、用药后呼吸系统及心血管系统的功能效应、生物反射等理想动物模型[1-3].东北农业大学兽医外科教研室结合国内外猫的麻醉现状及猫的独特的科研价值和在人们生活中所占有的独特的地位,开发出适合于猫的复方麻醉剂[4-5],并对其麻醉后呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SPO2)、呼末二氧化碳分压(PetCO2)、每分钟通气量(MV)和潮气量(TV)等指标进行监测,以评价该制剂对猫呼吸功能的影响.  相似文献