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1.
表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌感染动力学   总被引:1,自引:0,他引:1  
用表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550(pYAGFP)给BALB/c小鼠尾静脉注射和口服,时小鼠脏器进行细菌计数,并用间接ELISA法测定血清中抗细菌的抗体。结果表明,静脉注射重组菌的小鼠在肝脏、脾脏中重组菌数量有2个峰值,总的趋势是越来越少,而血清中抗体效价越来越高,可以初步推断,肝脏、脾脏中的细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性;口服重组菌的小鼠,在各脏器中重组菌的数量呈现正态分布的变化趋势,其中派伊尔结(Peyer’s patches,PPs)中细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性,而脾脏、肝脏及肠系膜淋巴结中细菌数量与血清中的抗体滴度无关。  相似文献   
2.
单抗竞争ELISA检测猪沙门氏菌感染方法的建立与应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
以猪霍乱沙门氏菌作为包被抗原 ,利用沙门氏菌O7单克隆抗体酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪霍乱沙门氏菌抗体。经过研究确定抗原包被浓度为 2×1 0 8CFU/ml,血清检测稀释度为 1∶1 6,酶标抗体浓度为 1∶70 0 ,包被液为碳酸盐缓冲液 ( 0 .0 5MpH9.6)。应用单抗竞争ELISA和平板凝集试验 (PAT)同时对 5 0 6份血清进行猪霍乱抗体检测 ,PAT的检出率为 3 .60 % ,ELISA检出率为 5 .75 % ,两者符合率达 96.4%。试验结果表明 ,ELISA方法敏感性高 ,特异性强 ,稳定性和重复性好 ,操作简便。本方法的建立在猪群沙门氏菌感染的检疫、实验室诊断的标准化及流行病学调查方面具有应用价值。  相似文献   
3.
根据鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)的16SrRNA基因序列,设计并合成了探针MG和MS共同目的基因,跨幅为580bP的一对引物。用这对引物对2个标准的MG和1个标准的Ms菌株DNA模板进行聚合酶锭反应(PcR),结果得到了预期大小约580bP的PcR产物。回收纯化琼脂糖电泳凝肢中的MG扩增产物克隆至T载体中,DIG随机引物法合成核酸探针,斑点杂交试验对MG和MS均呈阳性,检测灵敏度分别为2ng和3ng,其它对照菌(毒)株为阴性。  相似文献   
4.
抗猪支原体共同抗原单克隆抗体的制备与鉴定   总被引:4,自引:2,他引:2  
以猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)168菌株F332作为抗原,免疫8周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得两株能稳定分泌特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株单抗与Mhp和猪鼻支原体(M.hyorhinis,Mh)等反应,而不与鸡支原体,对照血清等反应。结果表明两株单抗可能是针对猪支原体共同抗原的单抗,用SDS-PAGE电泳和Western-blot分析猪支原体的膜蛋白成分。结果显示,猪支原体的共同抗原是80kd和30kd蛋白,两株单抗均与Mhp和Mh的30kd蛋白条带反应,表明这两株单抗特异地针对猪支原体的共同抗原成分30kd蛋白,可以看出,这两株单抗在Mhp的抗原分析,血清学诊断和疫苗质量监测以及猪源支原体污染细胞检测等方面有重要应用价值。  相似文献   
5.
杀球灵 (Diclazuril)是防治鸡球虫病众多药物中用量最小的一种抗球虫新药。其预混剂推荐混饲浓度为 1mg/kg ;近年来研制成功并投放市场的该药饮水剂 ,不同生产者的推荐使用剂量不一 ,更有养鸡生产者在治疗鸡球虫病时使用加倍用量的方法。本试验旨在探讨杀球灵饮水剂在预防鸡球虫病时的适宜使用剂量。1 材料与方法1 .1 试验动物河南农业大学畜牧站提供的新罗曼公雏 ,出壳后即在经火焰消毒的铁丝笼内喂养。饲料经80℃处理 2小时。饮水为自来水。1 .2 试验用球虫卵囊河南农业大学牧医工程学院寄生虫学实验室继代保存的柔嫩艾…  相似文献   
6.
应用PCR技术对鸡毒支原体感染鸡病原的检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用已建立的检测MG和MS的PCR方法,对人工接种鸡毒支原体后2-20天的SPF鸡气管棉拭样品和气管、肺、肝、脾、胸肌、腿肌等器官和组织进行了检测;对现场采集的样品同样作PCR检测。结果表明,上述人工样品均检测到病原,以气管棉拭样品检出量多;现场样品PCR阳性检出率为10.28%,分离培养的阳性率为2.8%,阳性符合率为100%。  相似文献   
7.
PCR检测鸡毒霉形体和鸡滑液囊霉形体的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
根据禽霉形体16S rRNA的基因序列设计,合成了1对引物,用这对引物对鸡霉素形体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊霉形体(Mycoplasma synoviae,MS)菌株DNA进行PCR扩增,得到了与预期大小相一致的580bp的PCR产物,而这对引物对其他畜病病原DNA或RNA模板的扩增结果为阴性,PCR方法对MG和MS的最小检出量分别为2pg和3pg,应用已建立的PCR方法检测MG人工感染样品和临床样品,从人工感染样品中均检测到MG,临床样品的MG阳性检出率为10.25%,高于常规分离培养的阳性检出率。  相似文献   
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