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为了通过诱变筛选获得豆豉溶栓酶高酶活菌株.研究以豆豉溶栓酶产生菌株Bacillus subtilis LD-8547为出发菌株,分别通过紫外线诱变和硫酸二乙酯的复合诱变,根据奶粉平板和血粉平板上菌落透明圈的大小进行初筛和复筛.并采用四肽底物测定法进行了溶栓酶的酶活力测定.结果表明,通过实验获得了产豆豉溶栓酶酶活力达18 228 U/mL的LD-8547-25菌株,比诱变出发菌株的酶活力提高了107%.为豆豉溶栓酶高酶活菌株的诱变筛选提供了有益的试验数据. 相似文献
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以花生父本(ICGV94449A)、母本(粤油169)和子代(抗黄1号)为材料,采用RAPD研究了它们之间的亲缘关系。结果发现,引物Sangon-43、Sangon-45、Sangon-243、Sangon-257、Sangon-1094、Sangon-2098在抗黄1号中共扩增出36条带,全部能在ICGV94449A和粤油169中检出,而且Sangon-43、Sangon-45和Sangon-2098等引物的电泳图谱中有父子带;引物Sangon-243的图谱中有母子带;在引物Sangon-257的图谱中则出现了减弱带,显示了抗黄1号同时具有了ICGV94449A和粤油169的某些遗传信息,表明抗黄1号为ICGV94449A和粤油169的后代。 相似文献
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黄曲霉毒素B_1胁迫相关小鼠肝脏线粒体蛋白的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了加强经黄曲霉毒素B1感染后肝脏线粒体差异表达蛋白的检测,以助于预防中毒的爆发和扩散,以黄曲霉毒素感染小白鼠,10周后提取小白鼠的线粒体蛋白,通过蛋白质双向电泳技术研究黄曲霉毒素对小鼠线粒体蛋白组差异表达的影响。双向电泳结果发现有31个蛋白质点发生显著变化,其中有新出现或明显上调的7个蛋白质点以及缺失的或明显下调的6个蛋白质点。这些点大多处于5.2~9.0pI值范围内,分子量处于8~165ku之间。据此推测,毒素可能通过改变这些蛋白表达量,从而影响线粒体的功能,进而对小鼠产生毒性作用。 相似文献
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将丁香假单胞菌番茄变种DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)极毛蛋白hrpA基因克隆到pET32a(+)载体上,获得重组表达载体pET32a(+)-hrpA.将重组质粒转入宿主E.coli BL21(DE3)溶源菌中,通过SDS-PAGE分析表明,在1.0mmol.L-1异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组子成功表达了分子质量约为28 ku的融合蛋白(目标蛋白基因与硫氧还蛋白基因的融合表达产物).并利用Ni2+-NTA柱亲和层析分离获得纯化的HrpA蛋白,质量浓度为91.8 g.L-1. 相似文献
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采用双向电泳及质谱分析等方法分析了黄曲霉毒素B1对小鼠肝脏蛋白表达的影响。结果表明,黄曲霉毒素B1不仅能使小鼠逐渐消瘦,肝脏组织出现病变,且能诱导或抑制肝脏部分蛋白的表达。经双向电泳发现,有35个蛋白质点发生变化。对其中新出现或明显上调的5个蛋白质点以及缺失的或明显下调的7个蛋白质点进行质谱分析,结果发现,有5个蛋白属于引发小鼠肝脏发生病变甚至是癌变的蛋白,7个蛋白属于参与小鼠肝脏能量与物质代谢的蛋白,这些蛋白对小鼠肝脏癌变过程都有一定的影响。黄曲霉毒素B1可能通过作用于这些蛋白质使小鼠肝脏发生病变甚至是癌变。本研究鉴定出了12个蛋白,为后续研究黄曲霉毒素B1诱发肝脏癌变的机理及其对人类肝脏蛋白的影响打下基础。 相似文献
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抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选 总被引:2,自引:0,他引:2
从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库.通过辅助噬菌体M13K07感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pⅢ的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库.将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体.进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争EUSA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、383和4A2. 相似文献
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小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+2mg·L-12,4D+8g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1IAA+8g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21.5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,Xgluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用Xgluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点. 相似文献
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21个自然保护区植物区系分类定量研究 总被引:3,自引:0,他引:3
先对指标(分布类型)进行筛选,后用主成分分析,选定3个主成分作为变量进行聚类分析.结果表明,21个保护区可归成5类:第一类为海南五指山,云南西双版纳和广东古田自然保护区;第二类为滇川干热河谷;第三类是广东丹霞山,福建万木林、武夷山,浙江凤阳山、龙王山,江西庐山,湖北大洪山;第四类包括河南宝天曼,山东泰山、昆嵛山,陕西长青、太白山,山西芦芽山、霍山,河北雾灵山、太行山;第五类是长白山植物区系核心部分的长白山. 相似文献