植物生长调节剂基本知识     

金岩  李洪刚  吴亚玉  张宝路 《油气储运》2011,(22):40-42

随着植物激素的陆续发现和人工合成植物生长调节剂的不断问世,用植物生长调节剂调节植物的生长发育已成为国内外发展迅速的一项科研与应用课题,植物生长调节剂在调节植物生长、增加农作物产量、改善产品品质及产品保鲜等方面已取得了显著的效果。山东省是农业大省,自上世纪50～60年代以来,植物生长调节剂就在我省农业生产中逐步推广应用,目前正广泛应用于种子处理、生根发芽、矮壮抗倒、整形催  相似文献   

转基因羊的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

张宝路  连正兴 《黑龙江畜牧兽医》2008,(12)

转基因技术是指利用生物技术手段，将外源DNA整合到动物基因组中，使其能够稳定遗传给下一代。2006年6月2日，GTC生物治疗公司利用转基因羊生产的重组人抗凝血酶Ⅲ——“ATryn”获得欧洲药品局的认证并批准上市，这不仅是转基因羊研究领域的重大突破，也标志着历经20多年的转基因动物研究进入成熟阶段，产业化发展形成规模。现将转基因羊的研究进展综述如下。  相似文献   

用猪骨髓间充质干细胞为供体生产猪的转基因胚胎     

潘求真  潘登科  王海  张宝路  李海  韩红兵  李佳  连正兴  杨宁  李宁 《广西农业生物科学》2006,25(Z1):1-4

以pEGFP-N 1质粒,通过电转染的方法转染了猪骨髓间充质干细胞,经过G 418筛选,获得了阳性细胞克隆。以转染的猪骨髓间充质干细胞与体外成熟(in v itro m aturation,IVM)的卵母细胞构建克隆胚。结果表明:通过体细胞核移植技术,猪骨髓间充质干细胞可以有效地生产转基因囊胚,并且绿色荧光蛋白可用于转基因胚胎的筛选。  相似文献   

巢式PCR扩增SRY基因序列鉴定牛胚胎性别的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

白文林  尹荣焕  罗光彬  孙明亮  周晨阳  纪英卓  姜午旗  张宝路 《安徽农业科学》2006,34(8):1589-1590

源于牛X和Y染色体同源区的1对外引物P1、P2及其各自特异区的2对内引物P3、P4和P5、P6进行巢式PCR反应,对中国荷斯坦公、母牛静脉血样及牛胚胎样进行特异性条带鉴定。结果表明,中国荷斯坦公牛出现178bp和262bp2条带,而母牛仅出现262bp1条带;静脉血样与实际性别相符率为100%;巢式PCR胚胎性别鉴定技术方法准确、简便,具有很高的灵敏性及稳定性。  相似文献   

基因组编辑技术在鱼类基因功能研究及鱼类遗传改良中的应用     

张宝路  李鸣  毛可佳  邓守龙 《黑龙江畜牧兽医》2018,(5)

利用分子生物学技术将重组基因转移到鱼类中进行人工修饰是目前研究的热点。分子生物学为基因组编辑提供了技术基础,分子生物学领域不断获得新发现为基因组编辑方法的优化与应用提供了有力保障。基因组编辑技术是一种能精确改造生物基因组,实现基因定点敲除和外源基因定点整合的技术,其可实现鱼类的品种改良和鱼类模型构建,亦是研究基因功能的重要手段。目前,运用此技术已建立了多种转基因鱼,并且能够实现外源基因的组织特异性启动,控制外源基因在特定的时间和/或特定的组织器官内表达。文章主要综述了与鱼类基因组编辑相关的方法,以及鱼类作为动物模型在遗传改良上的应用。  相似文献   

6-磷酸葡萄糖对鸡类囊胚发育的影响     

张宝路  潘求真  韩红兵  邓学梅  连正兴  李宁  李佳 《广西农业生物科学》2006,25(Z1):83-90

由鸡Ⅹ期胚盘获得的类囊胚包含禽类胚胎干细胞,且具有较强的增殖与分化能力。体外培养12、24、36 h的类囊胚细胞S tathm in基因的表达高于Ⅹ期胚盘细胞,证实增殖的细胞为禽类胚胎干细胞。超微结构观察表明,类囊胚细胞在早期增殖过程中以卵黄蛋白为能量的主要来源,当卵黄蛋白消耗殆尽,则细胞出现大量死亡。胚胎干细胞培养液(ESM)能够促进类囊胚细胞的增殖却不能减少死亡。在ESM基础上添加5 mm o l/L 6-磷酸葡萄糖(G 6P),不仅各期细胞增殖显著,且24 h细胞死亡数的比例(D/T)由23%下降到5.6 7%(P<0.0 5),3 6 h细胞D/T由3 0%下降到1 5.6 3%(P<0.0 5)。结果表明,在ESM基础上添加5 mm o l/L G 6P可促进类囊胚细胞的增殖,并明显改善能量匮乏导致的细胞死亡。  相似文献   

绵羊sTLR4基因的克隆表达及定位   总被引：1，自引：1，他引：0  

杜金苓  韩红兵  张宝路  连正兴 《中国畜牧杂志》2011,47(9)

采用RT-PCR方法克隆绵羊TLR4基因的一种新型剪接体形式sTLR4,将sTLR4与EGFP构建融合蛋白表达载体。用EcoR I和Sma I分别双酶切质粒pEGFP-N1和sTLR4基因的PCR产物,采用T4连接酶进行连接,将质粒转化TOP10菌株,挑取阳性克隆采用AgeI和VspI对质粒进行双酶切鉴定。经鉴定的质粒采用电击方法转染胎儿成纤维细胞,在激光共聚焦显微镜下观察sTLR4蛋白在成纤维细胞中的定位情况。结果表明:构建的融合蛋白pEGFP-N1-sTLR4能够在成纤维细胞中正常工作,且sTLR4-EGFP融合蛋白可以在细胞膜上表达。  相似文献   

绿色荧光蛋白表达载体的改造和表达     

潘求真  徐曙光  李佳  张宝路  田亮  李海  韩红兵  连正兴  杨宁 《黑龙江畜牧兽医》2007,(1):13-15

为获得增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的真核表达载体pEFP-N1-MSC,并观察其在猪成纤维细胞中的表达情况,用Nhe Ⅰ和Age Ⅰ消除pEGFP-N1质粒上的多克隆位点(MSC),然后补平连接,获得增强型绿色荧光蛋白编码基因的真核表达载体pEGFP-N1-MSC质粒,将pEGFP-N1-MSC质粒转化DH5α感受态细胞,于Kanr LB平板上筛选阳性克隆.重组子经Nhe Ⅰ和Age Ⅰ双酶切鉴定,将该载体转染猪成纤维细胞,24 h后观察EGFP表达情况,48 h后添加G418进行筛选.结果表明:改造的pEGFP-N1-MSC真核表达载体,成功转染猪成纤维细胞,在倒置荧光显微镜下呈现绿色光,获得可产生绿色荧光的pEGFP-N1-MSC载体,为构建猪双正选择同源重组载体奠定了基础.  相似文献