免疫荧光染色质量影响因素分析     

宋瑞龙  周子彦  徐天祺  潘士锋  刘宗平 《安徽农业科学》2019,47(16)

免疫荧光技术是标记免疫技术中应用最为广泛的一项技术,具有特异性强、灵敏度高、速度快和便于观察等特点。影响免疫荧光染色质量的因素多种多样,从荧光染料、抗体、样品前处理、染色过程等几个重要的方面入手,就如何提高免疫荧光染色质量,以获得一张高分辨率的图片做了详细的介绍。该研究有利于提高免疫荧光染色质量,为生命科学研究提供了有力帮助。  相似文献   

Cdc42调控细胞骨架影响破骨细胞分化的研究     

宋瑞龙  徐天祺  梁琰  曹莹  刘宗平 《畜牧与兽医》2020,(3):50-55

研究Cdc42在破骨细胞分化成熟过程中的作用及分子机制。采用慢病毒干扰技术构建Cdc42沉默的RAW264.7细胞株,经嘌呤霉素筛选出稳转株。利用荧光定量PCR与Western blot检测其沉默效率。采用TRAP染色观察细胞分化能力。利用激光共聚焦显微镜观察Cdc42沉默经微丝和微管对细胞伪足形成的影响。利用荧光定量PCR与Western blot检测TRAP、PAK4、Cofilin转录和蛋白表达水平。与对照组比较,Cdc42沉默组Cdc42基因的转录极显著下降,蛋白表达水平显著下调,基因沉默效率在50%以上。TRAP阳性破骨细胞数量也急剧减少,细胞呈圆形。丝状伪足和板状伪足减少,TRAP、PAK4、Cofilin转录水平极显著下降,关键蛋白PAK4和Cofilin蛋白表达显著或极显著下调。Cdc42可通过调控细胞骨架蛋白,经丝状伪足和板状伪足,影响破骨细胞的分化。  相似文献