过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性     

朱芳芳  董亚辉  任真真  王志勇  苏慧慧  库丽霞  陈彦惠 《中国农业科学》2021,54(21):4500-4513

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。  相似文献   

应急用一次性防护服 60Co-γ辐照操作规程     

崔智博  陶烨  杜霖春  佟俊生  李晓平 《农业科技与装备》2020,(3)

总结和提炼辽宁省生产的SF-A材质应急用一次性防护服加工技术操作规程,包括适用范围、规范性引用文件、术语和定义、辐照装置通用技术要求和辐照加工过程等内容,以期为今后应急用一次性防护服辐照消杀提供参考。  相似文献   

奶牛高产配套技术的推广和效益   总被引：3，自引：0，他引：3  

胡祖富  吴春金 《浙江畜牧兽医》1994,19(2):37-39

奶牛高产配套技术的推广和效益胡祖富，吴春金，卢玉琪（金华市婺城区农村水利局）（金华市畜牧兽医站）党的十一届三中全会以来，金华市奶牛迅猛发展，１９８７年全市饲养奶牛１．３万头，产鲜奶２万余吨，曾被誉称“江南奶牛之乡”。但１９８８年奶牛生产出现了大滑坡，...  相似文献   

油菜花期性状与经济性状的相关性     

王国槐  官春云 《湖南农学院学报》1994,20(1):27-30

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高产稻区水稻生产状况调查报告     

汪大明  宋春芳 《作物研究》1992,(A04):49-50,48

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提高云南昆明地区种鸡蛋孵化率的措施   总被引：1，自引：0，他引：1  

舒相华  宋春莲 《动物科学与动物医学》2004,21(5):44-45

随着养禽业的迅速发展。家禽孵化技术也得到了不断提高。国内部分发达地区，孵化已向大中型化、自动化、标准化和配套化等方向发展。在云南昆明地区。孵化主要还是小规模、中小型化，由于种种原因。种蛋孵化率一直偏低。笔者根据多年来的孵化经验，总结提出在云南昆明高海拔地区要注意控制好孵化温度、湿度。适当补充氧气，把好种蛋品质关，是影响孵化率的重要因素。  相似文献   

奶牛真胃溃疡的诊治   总被引：1，自引：0，他引：1  

介春霞  任修宇 《今日畜牧兽医》2005,(4)

1病因真胃溃疡是奶牛和犊牛常见的疾病。真胃溃疡的发生与集约化饲养(导致发现不及时)和饲喂精料及青贮等高酸性日粮有关。多数出现临床症状的奶牛发病期是在泌乳后4～6周,类似于真胃变位和一些代谢性疾病(如酮病)的发病高峰期。此时期发生的真胃溃疡常不易被发现或发生误诊。2.临床症状2.1穿孔性真胃溃疡引发局灶性腹膜炎其症状与创伤性网胃腹膜炎相似。真胃内容物急性漏出时会被纤维素性黏连包围,造成真胃与膜或瓣胃黏连。奶牛呈现不同程度的厌食,体温常达39.5℃～40.5℃,瘤胃蠕动减少或停滞,腹痛。病畜不愿走动,腹壁触诊存在疼痛反射区(…  相似文献   

油权雨季直播     

李小茹  周春合 《河北林业》2001,(3):10-10

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红松与色赤杨混交林改土效果显著     

王玉江  初晓丽 《新农业》2009,(11):47-47

红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落，由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰，现存量极少，代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一，导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来，通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施，培育了大面积红松阔叶混交林，其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分，现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。  相似文献   

猪八种腹泻病的鉴别与治疗     

张东双  户广影 《农民致富之友》2009,(13)

猪腹泻在实践中比较多见而不易区别,给临床治疗造成困难.现将猪几种腹泻病的鉴别诊断及治疗分别简述如下:  相似文献