广藿香组织培养快繁技术的研究     

曹嵩晓  李碧英  李娟玲  刘国民  韦江云 《热带生物学报》2011,(2):143-147

以广藿香幼嫩叶片为外植体,通过愈伤组织途经诱导出大量丛生芽,然后将丛生芽分别转接到含有不同质量浓度6-BA的增殖培养基和含有不同质量浓度IBA的生根培养基上,筛选出最适增殖培养基：MS＋6-BA 0.1～0.2 mg.L-1,最适生根培养基：1/2 MS＋IBA 0.25～1.0 mg.L-1。广藿香组培苗株高达5～6 cm时进行炼苗移栽,移栽成活率高达95%。  相似文献   

利用单因子和正交设计双重实验方法优化广藿香ISSR-PCR实验体系     

曹嵩晓  李娟玲  刘国民  王艺  戴景 《热带生物学报》2011,(1):35-41

为了建立广霍香优化的ISSR-PCR反应体系,首先通过单因子试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计的方法,对影响广藿香ISSR-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验。结果表明：广藿香ISSR-PCR的优化反应体系最终确定为：在25μL反应体系中,含DNA模板40 ng,Mg2＋浓度为2.5 mmol·L^-1,引物浓度为0.3μmol·L^-1,TaqDNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为150μmol·L^-1。PCR扩增程序为：94℃预变性5 min,然后按94℃变性45 s,52.7℃退火45 s,72℃延伸90 s,进行40个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存。  相似文献   

利用单因子和正交设计双重实验法优化鹧鸪茶RAPD-PCR反应体系   总被引：1，自引：1，他引：0  

李娟玲刘国民  曹嵩晓罗轶奇 《农学学报》2011,1(4):14-21

为了建立鹧鸪茶RAPD-PCR的优化反应体系,首先通过单因素试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计方法,对影响鹧鸪茶RAPD-PCR反应的5种因素进行四水平优化试验。并运用SAS软件对试验结果进行了分析,最后确定优化的RAPD-PCR反应体系为：10×Buffer缓冲液2.5 μL+Mg2+ 2.5 mmol/L + dNTPs 0.2 mmol/L + TaqDNA聚合酶1.5 U + S28引物0.48 mmol/L + 80 ng模板,定容至25 μL。PCR扩增程序为：94℃预变性4 min,然后按94℃变性30 s,38℃退火45 s,72℃延伸120 s,进行45个循环,最后72℃延伸10 min;16℃保存。该优化的RAPD-PCR反应体系具有良好的稳定性和重现性,可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析。  相似文献   

利用单因子和正交设计双重实验法优化鹧鸪茶RAPD-PCR反应体系     

李娟玲  刘国民  曹嵩晓  罗轶奇 《农学学报》2011,(6)

为了建立鹧鸪茶RAPD-PCR的优化反应体系,首先通过单因素试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计方法,对影响鹧鸪茶RAPD-PCR反应的5种因素进行4水平优化试验。并运用SAS软件对试验结果进行了分析,最后确定优化的RAPD-PCR反应体系为:10×Buffer缓冲液2.5μL+Mg2+2.5mmol/L+dNTPs0.2mmol/L+TaqDNA聚合酶1.5U+S28引物0.48mmol/L+80ng模板,定容至25μL。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,38℃退火45s,72℃延伸120s,进行45个循环,最后72℃延伸10min;16℃保存。该优化的RAPD-PCR反应体系具有良好的稳定性和重现性,可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析。  相似文献