桑粒肩天牛幼虫内切-β-1,4-葡聚糖酶的纯化及性质   总被引：1，自引：0，他引：1  

殷幼平  王中康  曹月青  何正波 《林业科学》2004,40(2):103-106

经丙酮沉淀、UltrogelAcA5 4凝胶过滤、Q Sepharose离子交换柱层析和聚丙烯酰胺凝胶制备电泳 ,发现桑粒肩天牛幼虫肠液中具有所有水解纤维素成分的三种消化酶 ,并且每种酶都有不同数目的同工酶。纯化出一种内切 - β- 1 ,4 -葡聚糖酶 (EG - 1 ) ,其分子量为 2 6ku ,等电点约为pI4 0。酶的最适反应温度为 4 5℃ ,最适反应pH为5 2 ;不耐热 ,5 0℃处理 30min ,酶活大大降低 ,70℃处理 2h ,几乎丧失全部活性 ,显示出该酶适合动物肠道反应环境 ,是内源性酶。  相似文献   

应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒   总被引：6，自引：0，他引：6  

刘红光  王中康  曹月青  夏玉先  殷幼平 《植物病理学报》2008,38(1):24-30

 根据柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列设计cquctv9/cquctv10特异引物对,以柑桔RNApolymeraseⅡ基因作为内参照,建立了柑桔衰退病的常规RT-PCR快速检测体系;依据柑桔衰退病毒P20基因序列设计cquctv1/cquctv2特异引物对和TaqMan探针cquctvp1,建立了柑桔衰退病荧光定量RT-PCR快速检测体系。常规RT-PCR检测下限是含有CTV的50pg总RNA,荧光定量RT-PCR法的检测下限是2fg纯CTV片段。荧光定量RT-PCR的灵敏度相对比常规RT-PCR高100倍。利用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR体系对从2005年3月到2006年7月采自田间的样品进行检测,结果表明,2种检测体系都有很好的特异性和准确性;对183个田间柑桔苗木样品带毒率检测结果表明,荧光定量RT-PCR检出率为(82.5%),比常规RT-PCR检出率(73.2%)高。  相似文献   

利用DSN和SMARTTM技术构建金龟子绿僵菌产孢时期均一化全长cDNA文库   总被引：2，自引：0，他引：2  

张石柱  王中康  彭国雄  曹月青  殷幼平  谢磊  刘静  夏玉先 《农业生物技术学报》2007,15(5):884-887

  相似文献   

桑粒肩天牛3种纤维素消化酶的分布   总被引：6，自引：1，他引：5  

殷幼平  曹月青  何正波  董亚敏 《林业科学》2000,36(6):82-85

将桑粒肩天牛唾腺匀浆、肠道分段冰冻切片后抽提,测定各部分内切－β－１,４－葡聚糖酶（Ｃｘ）,纤维二糖水解酶（ＣＨＢ）,β－１,４－葡萄糖苷酶在肠道及唾腺中的酶活与分布。结果发现９７．１３％的Ｃｘ酶,９５．７％的β－１,４－葡萄糖苷酶的９７．０３％的ＣＨＢ酶存在于桑粒肩天牛中肠,唾腺中没有检测到酶活性,结合天牛消化道形态和组织学特征,证明桑粒肩天牛纤维素酶的主要来源是内源性的。  相似文献   

桑粒肩天牛卵在桑树树干上分布规律的调查     

何正波  曹月青 《四川蚕业》2001,29(1):41-42

<正> 桑粒肩天牛(Apriona gerrnari(Hope))是桑树重要的钻蛀性害虫,蛀食树干和枝条,严重影响其生长发育,甚至造成整株枯死。由于该虫营钻蛀性生活。较为隐蔽。因此卵期是掌握该虫种群数量变动的重要时期。为此我们于2000年5～7月份对桑粒肩天牛卵在桑树树干和枝条(以下统称树干)上的分布规律进行了调查。现将结果报道如下。  相似文献   

柑橘溃疡病生防菌株CQBS03的鉴定及其培养特性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈力  王中康  黄冠军  曹月青  夏玉先  殷幼平 《中国农业科学》2008,41(8):2537-2545

【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16SrDNA序列分析鉴定其分类地位;以单因素试验和正交设计方法对影响CQBS03菌株抑菌活性物质产生的各种培养条件进行优化;利用硫酸铵沉淀获得抑菌物质粗提物并测定其对温度、蛋白酶及氯仿的敏感性。【结果】经鉴定CQBS03为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培养液中,能被80％饱和度硫酸铵沉淀,最高可耐受的温度范围为60-70℃;活性成分在280nm处有最大吸收峰,分子量大于10kD,对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,而对氯仿部分敏感。培养特性研究表明,CQBS03最适培养基为YPG液体培养基,抑菌物质产生的最适培养条件为：pH8．0左右,28℃培养72h。【结论】枯草芽孢杆菌CQBS03所产生的抑菌物质主要成分是蛋白质,且属于外泌型蛋白;该抑菌蛋白对多种植物病原菌有抑菌作用,尤其对柑橘溃疡病菌抑菌活性高,稳定性好,是一株极具开发潜力的生防菌株。  相似文献