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试验应用淋巴细胞杂交瘤技术,以制备的P4免疫抗原免疫Balb/c小鼠为试验动物,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA方法进行筛选,采用有限稀释法进行细胞克隆,经过3次克隆筛选,最终获得2株能稳定分泌P4单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为8G6、11A11.杂交瘤细胞培养上清液和小鼠腹水中2株单抗ELISA效价分别为1∶512 000,1∶216 000.单克隆抗体与检测抗原和对照均不发生交叉反应,显示出良好的特异性,灵敏度高,且8G6的亲和力优于11A11.奶牛孕酮单克隆抗体的获得为P4检测试剂盒的研制奠定了基础. 相似文献
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奶牛孕酮单克隆抗体的制备及其酶免疫测定方法的初步建立 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]制备奶牛孕酮McAb,建立孕酮酶免疫检测方法,为研制检测试剂盒奠定基础。[方法]用琥珀酰亚胺法将孕酮与钥孔血蓝蛋白(KLH)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,免疫BalB/c小鼠,建立杂交瘤细胞株制备McAb,对McAb特异性、亚类、交叉反应性及相对亲和力等进行鉴定,筛选最佳McAb,建立酶免疫检测方法。[结果]获得3株杂交瘤1F6、2G6和2A11,腹水效价依次为1∶1×106、1∶1×105和1∶8×104,其中1F6为IgG2b亚型,2G6和2A11为IgM亚型,3株McAb都能和游离孕酮发生特异性反应,相对亲和力1F6>2G6>2A11,其中1F6对雌二醇的交叉反应率小于0.01%。选用1F6与酶标孕酮建立ELISA检测方法,制作标准曲线,检测范围为0.5~100.0ng/ml。[结论]该研究制备的单克隆抗体,可用于建立孕酮酶免疫检测方法,为奶牛孕酮水平的定量监测提供了较实用的方法。 相似文献
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<正>生产瘫痪又叫乳热症或低血钙症,中兽医称为产后风,是母畜分娩前后突然发生的一种严重代谢性疾病。母猪虽然较少发生,但发病后会引起母猪泌乳量减少,乳汁质量下降,严重影响仔猪生长发育,导致仔猪生长迟 相似文献
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利用细胞凋亡试剂盒（POD）及小鼠抗大鼠增殖细胞核抗原（PCNA）单克隆抗体将淋巴白血病中的凋亡细胞与增殖细胞准确地染色显示出来,并进行对比观察分析.结果表明,奶牛淋巴白血病中有凋亡细胞与增殖细胞,细胞凋亡与细胞周期调控是肿瘤发生发展的两方面.单克隆抗体免疫细胞化学方法可以很好地检测PCNA和细胞凋亡的表达,PCNA与细胞凋亡可作为奶牛淋巴白血病细胞增殖活性的指标,其表达可能是急性白血病预后不良的一个指标.可以认为牛淋巴白血病乃是细胞死亡被抑制,而细胞的增殖率相对升高的病理过程. 相似文献
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生物传感器研究和开发的目的是向社会提供采用生物传感器原理的新仪器和分析控制方法。Clark和Lyons最先提出生物传感器的设想，到现在为止国际上研究成功的酶传感器有几十种，如葡萄糖、乳酸、胆固醇和氨基酸等传感器。唐芳琼等研制的纳米增强葡萄糖传感器，开辟了制备直接电子传递第3代生物传感器的新途径和纳米颗粒应用的新领域。 相似文献
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