‘克新13号’马铃薯植株再生和转化技术     

马文科  朱雨莹  陈兆贵  李希陶  林燕文  雷佳 《湖南农业科学》2024,(1):7-13

为研究马铃薯植株再生和转化技术,以‘克新13号’的茎段、叶片和微型薯为外植体,接种到不同激素配比的培养集中进行愈伤组织诱导和分化,再采用农杆菌转化法,初步建立了马铃薯遗传转化再生体系。结果表明：茎段是‘克新13号’马铃薯比较理想的外植体材料,最佳的愈伤组织诱导培养基为4.4 g/L MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.4 mg/L KT,愈伤组织诱导率在95%以上;最佳的分化培养基为4.4 g/L MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+3 mg/L KT+0.5 mg/L GA₃+0.1 g/L肌醇,出苗率为56.25%;外植体预培养2 d后,用OD₆₀₀=0.5的农杆菌菌悬液侵染7 min,再共培养3 d,以50 mg/L Kan和200 mg/L Tim为抗生素进行筛选,能成功获得含目的基因Cas9p的转化植株。  相似文献