性控奶山羊精液X和Y精子分离比例检测方法的建立     

何琪富  王宇飞  张康  康健  张涌  权富生 《畜牧兽医学报》2021,52(1):107-115

旨在建立可以定量计算奶山羊精液中X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法,用以检测经过分离的奶山羊精液X和Y精子的数量和比例,为性控技术的开发和生产应用提供技术支撑。本研究选择X、Y染色体中特异基因F9及ZFY片段设计引物,建立标准曲线,优化荧光定量PCR反应体系和条件。通过对阳性标准品梯度稀释以及对60支已知纯度的性控精液进行测定（3次重复）来检验方法的敏感性和可靠性。结果显示,所建立的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,X和Y精子检测灵敏性分别为47和51 copies·μL^-1;利用该方法对商品化的奶山羊性控冷冻精液中X和Y精子的数量和比例进行计算,其结果与销售公司提供的X和Y精子的纯度无显著差异（P>0.05）,表明该方法结果可靠。本研究建立的计算奶山羊X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,灵敏度高,结果可靠,为计算奶山羊精液分离后X、Y精子数量及比例提供了快速可靠的方法。  相似文献   

渭北黄土高原东部尧山林场主要人工林土壤肥力综合评价     

冯雨星  白立强  赵晓娥  刘少波  程敏 《陕西林业科技》2023,(1):18-24

为给陕西渭北黄土高原建设和管理提供依据,以尧山林场油松林、侧柏林、刺槐林等3种主要人工纯林为对象,利用常规测试方法和主成分分析法对林地土壤肥力进行了测定分析和综合评价。结果表明3种林分土壤有机质含量均随土层深度增加而逐渐下降,腐殖质层pH值显著高于其他土层;刺槐林碱解N含量随土层的增加而逐渐下降,腐殖质层有效P含量显著高于其他土层;油松林有机质含量显著高于侧柏和刺槐林;刺槐林土壤pH值和碱解N含量显著高于油松和侧柏林,速效K含量显著低于油松和侧柏林;土壤有效P含量油松林>侧柏>刺槐林;3种林分土壤综合肥力差异较大,肥力综合分值油松林(1.01)>侧柏林(-0.34)>刺槐林(-0.99);油松林有机质含量高、刺槐林碱解N含量高;油松和侧柏林地土壤碱解N亏缺,刺槐林地速效K缺乏。  相似文献   

安哥拉母羊繁殖特性的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

权富生  杨蔼云 《中国畜牧杂志》1993,29(4):31-32

<正>安哥拉山羊是世界上著名的毛用山羊品种,我所于1985年在世界粮农组织的帮助下,在我国首次引进20只(12只母,8只公)安哥拉种羊。1989年在适应性观察的基础上,又引进128只(母109只,公19只),并在延安地区南泥湾建立了安哥拉山羊试验场,羊群已发展到400多只。本文根据我所引进安哥拉羊以来的繁殖、育种记载资料,进行统计分析,研究安哥拉母羊的繁殖特性,为发展我国马海毛业提供一些参考资料。 一、安哥拉母羊的一般繁殖规律 1.初配年龄和初配体重 根据我场1989～1991年71只初配羊的配种产羔记录统计,平均初配月龄为18.4±1.99个月,范围8～  相似文献   

转EGFP基因山羊克隆胚的发育     

郑月茂  刘凤军  安志兴  李向臣  赵晓娥  权富生  张涌 《畜牧兽医学报》2007,38(5):458-463

利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒,并将之导入山羊乳腺上皮细胞,经G418筛选获得阳性细胞,以阳性细胞作为核供体,利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果表明：用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体,电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液,在培养72 h后加入10%的正常山羊血清（Normal goat serum,NGS）。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达,大部分克隆胚发育到8-16细胞以后的时期,绿色荧光蛋白才开始逐渐表达,随着发育时间的延长,绿色荧光蛋白的表达也逐渐增强。说明外源基因在胚胎早期发育阶段可以表达,EGFP可以作为报告基因来实现对外源基因整合及表达的监测。  相似文献   

新建羊场突发传染性胸膜肺炎的控制   总被引：2，自引：1，他引：1  

马保华  赵晓娥 《动物医学进展》2000,(4)

新建羊场突然流行山羊传染性胸膜肺炎 ,体弱羊只最先表现临床症状 ,但剖检变化并不明显 ;体质强壮的羊出现临床症状较迟 ,较严重 ,难治疗 ,死亡率高 ,剖检变化也较为典型。发病羊及可疑羊占羊群 5 2 .2 % ( 1 6 8/32 2 )。死亡 2 8只 ,占发病和可疑羊 1 6 .7%( 2 8/ 1 6 8)。羊群拥挤 ,营养状况不良 ,圈舍阴冷潮湿是诱发本病的因素。连续注射氯霉素和培氟沙星 ,并口服小剂量土霉素对该病有良好的治疗效果。注射山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝菌苗有助于本病的治疗 ,并可有效防止本病的流行。  相似文献   

安哥拉山羊级进杂交后代生活力初步观察     

权富生  杨蔼云 《甘肃农业大学学报》1998,33(2):128-132

对安哥拉山羊及其级进杂交后代的生长发育、繁殖力、抗病性、采食习性等进行初步观察研究，结果表明：在试验场良好的饲养条件下，各代杂种羊生长发育正常，但繁殖力、抗病性、采食能力随级进杂交代数的增加有降低的趋势。据此，笔者认为，在陕北特定的生态经济条件下，培育毛用山羊新品种，级进杂交代数不宜太高，到Ｆ３代应停止级进，进行横交固定，而且在整个育种中，应始终注意饲养问题，以保证新品种培育成功。  相似文献   

奶牛体外成熟卵母细胞与X分离冻精体外受精及其胚胎发育   总被引：1，自引：1，他引：0  

马保华  刘闯  徐红强  赵晓娥 《农业生物技术学报》2010,18(4):753-759

比较了X分离冻精和未分离冻精与牛卵母细胞进行体外受精后,受精卵的卵裂率和胚胎发育率。X分离冻精组受精卵的卵裂率（51.4%）和囊胚发育率（19.7%）显著低于未分离冻精组（67.9%,29.9%,P〈0.05）;微量上浮非离心法处理X分离冻精和未分离冻精后,其受精卵的卵裂率（50.7%,65.5%）高于上浮离心法处理组（48.3%,63.8%）,但两种处理方法之间无统计学差异（P〉0.05）;同一种精子采用微量上浮非离心法或上浮离心法处理后,其卵裂胚的桑葚胚发育率和囊胚发育率无统计学差异（P〉0.05）;X分离冻精的受精卵与颗粒细胞和睾丸支持细胞共培养后,其卵裂率（50.0%,51.4%）与非共培养组（50.3%）无显著差异（P〉0.05）;两个共培养组的桑葚胚发育率（53.3%,54.6%）和囊胚发育率（21.1%,21.5%）均高于对照组（52.2%,20.4%）,但无统计学差异（P〉0.05）。  相似文献   

奶牛X性控冻精的卵胞质内精子注射研究     

徐红强  李键  马保华  郜勇  刘闯  赵晓娥 《农业生物技术学报》2010,18(5)

探讨奶牛X性控冻精的卵胞质内单精子注射(ICSI)技术的可行性及显微操作条件对奶牛X性控冻精ICSI效果的影响.结果表明,注射运动性控冻精ICSI卵的卵裂率和囊胚发育率均高于不运动组,但差异不显著(P>0.05).分别用5%、8%和10%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的精子操作液处理性控冻精,进行ICSI操作,ICSI卵的卵裂率差异不显著;但PVP在5%和10%时,正常卵裂率分别是78.4%和69.1%(P<0.05),囊胚率分别是29.7%和20.4%(P<0.05).精子显微注射时,将卵母细胞的极体调整在相当于时钟6点与12点的位置时,所获ICSI卵的卵裂率差异不显著,但正常卵裂率(76.4%,66.7%)和囊胚率(28.6%,19.0%)明显提高(P<0.05).结论认为,进行奶牛X性控冻精ICSI操作时,应选用运动精子,并用含5%PVP的精子操作液进行处理,而且注射在卵母细胞极体置于6点的位置,有利于ICSI卵体外发育.  相似文献   

山羊卵母细胞无血清体外成熟培养     

王国华  刘凤军  权富生  赵明涛  张玉玲  林慧  张涌 《农业生物技术学报》2007,15(3):424-428

为研究无血清培养系统对山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎早期发育力的影响,分别以0.3%牛血清蛋白(BSA)(mV)、1%聚乙烯醇(PVA)(mV)和1%胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠(ITS)(VV)代替成熟培养液中胎牛血清(FBS),以添加5?S的OM为对照组,对来源于屠宰场的卵巢卵母细胞复合体(COCs)进行体外培养。成熟率PVA添加组(50.00%)显著低于FBS组(83.23%)(P<0.01)、BSA组(71.19%)和ITS组(76.79%),与FBS组无显著差异(P>0.05);成熟卵母细胞用离子霉素联合6-DMAP激活,在SOFaa中进行孤雌胚培养,BSA、PVA、ITS及FBS各组的卵裂率依次为61.90%、46.97%、79.07%和83.58%,囊胚率分别为25.00%、19.70%、55.81%和60.45%。结果表明:在OM基础培养液中添加BSA或PVA,卵母细胞的成熟率明显低于添加FBS,且卵裂率和囊胚发育率也低于对照组(P<0.05或P<0.01);添加ITS,卵母细胞成熟率虽低于对照组,但孤雌胚卵裂率和囊胚发育率与对照组接近(P>0.05)。表明以ITS代替FBS,可用于山羊卵母细胞体外成熟培养。  相似文献   

无角道塞特羊胚胎移植技术研究     

权富生赵晓娥  张志平刘凤军  李向臣张涌 《勤云标准版测试》2005,(7)

(1)超排处理无角道塞特绵羊163只,育成羊(76只)只均回收胚胎5.53枚,可用胚3.91枚,经产母羊(87只)只均回收胚胎7.55枚,可用胚6.34枚。经产羊平均回收胚胎总数高于育成羊(P<0.05)。春季和秋季之间超排效果差异不明显。重复超排羊和非重复超排羊之间平均回收胚胎总数和可用胚胎数差异均不显著(P>0.05)。(2)共处理受体876只,春季和秋季受体的同期发情率分别为56.37%和89.02%,发情受体利用率分别为84.67%和88.77%。(3)移植受体545只,妊娠318只,产羔396只,受体移植妊娠率为58.35%,移植胚胎成羔率为57.47%,在移植受体中,小尾寒羊的妊娠率最高为61.2%,同羊和内蒙细毛羊分别为54.62%和56.58%,受体品种之间移植妊娠率差异不显著(P>0.05)。受体黄体数对移植妊娠率及胚胎成羔率有一定的影响。胚胎的发育阶段对移植妊娠率也有影响,移植囊胚受体妊娠率最高为64.76%,明显高于早期桑椹胚移植妊娠率42.86%(P<0.05)。胚胎成羔率从桑椹胚到囊胚差异不显著(P>0.05)。  相似文献