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[目的]根据SCoT多态性对湖南甜橙变异类型进行鉴定和分析。[方法]首先对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异。[结果]甜橙SCoT标记的20μl优化反应体系为:DNA模板80ng,Mg2+1.6mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.2μmol/L,TaqDNA聚合酶用量1.6U,扩增产物在100~2000bp,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性。24份试材的测序片段的大小为1090-1091bp,一致性达到99.84%,存在单碱基缺失与替换;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和‘安江香柚’。[结论]本研究将为甜橙的育种工作提供科学的理论依据。  相似文献   
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以永兴冰糖橙春稍叶片和秋稍叶片上的溃疡病斑为材料,通过不同方法进行病原菌的分离,并对分离得到的细菌进行鉴定。结果表明,春稍叶片上的新病斑比秋稍叶片上的老病斑易于分离得到纯的病原菌,以春稍病斑为材料,用稀释法分离细菌的过程较简单,且经PCR和活体接种鉴定后证明分离得到的细菌为柑橘溃疡病菌,可用于后续研究。  相似文献   
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以永兴冰糖橙春稍叶片和秋稍叶片上的溃疡病斑为材料,通过不同方法进行病原菌的分离,并对分离得到的细菌进行鉴定。结果表明,春稍叶片上的新病斑比秋稍叶片上的老病斑易于分离得到纯的病原菌,以春稍病斑为材料,用稀释法分离细菌的过程较简单,且经PCR和活体接种鉴定后证明分离得到的细菌为柑橘溃疡病菌,可用于后续研究。  相似文献   
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SCoT结合克隆测序鉴别湖南甜橙变异类型   总被引:6,自引:1,他引:5  
本试验对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异;结果表明,甜橙SCoT标记的20 μL优化反应体系为:DNA模板80 ng,Mg2+浓度1.6 mmol/L,dNTPs浓度0.3 mmol/L,引物浓度0.2 μmol/L,Taq DNA聚合酶用量1.6 U,扩增产物在100~2000 bp之间,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性。24份试材的测序片段的大小为1090~1091 bp,一致性达到99.84%,存在单碱基的缺失与替换,BLAST结果显示,该序列的编码蛋白质与核糖体蛋白S3的N端同源性高;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和‘安江香柚’,其他变异株系还需要结合其它的分子标记技术来进行鉴别,有待进一步研究。  相似文献   
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