用GPC-HPLC法测定植物组织中的细胞分裂素     

李金克  邓文红  陈少良 《北京林业大学学报》2012,34(6):155-159

为了探讨和开发凝胶渗透色谱（GPC） 高压液相色谱（HPLC）法定量测定植物组织中的细胞分裂素,以群众杨叶片和烟草组培苗为试验材料,根据细胞分裂素标准品回收率的测定,得出最佳试验方法:80%甲醇研磨后4 ℃浸提24 h,抽滤,滤液离心,上清液加2滴氨水,40 ℃浓缩至干,用含3%甲醇的CH2Cl2 溶解样品,经0.22 μm滤膜过滤后过GPC纯化,最后HPLC外标曲线法定量。用液相-质谱联用仪（LC-MS）对所检测的细胞分裂素定性。测试表明:群众杨叶片中玉米素鲜质量含量439.501 8 ng/g,烟草叶片中玉米素鲜质量含量为617.995 7 ng/g。在植物样品中检测到的激动素（鲜质量含量49.473 9～124.712 4 ng/g）应为外源引入。研究结果表明,GPC纯化植物细胞分裂素后用HPLC定量是可行的。   相似文献   

盐胁迫条件下杨树组织及细胞中钾、钙、镁的变化   总被引：20，自引：2，他引：20  

陈少良  李金克  尹伟伦  王沙生  Eberhard Fritz  Andrea Polle  Aloys Hüttermann 《北京林业大学学报》2002,24(5):84-88

该文研究了NaCl对群众杨(Populus‘popularis 35-44', P. popularis)、I-214杨(P. ×euramericana cv. I-214, P. cv. I-214)和胡杨(P. euphratica)3种杨树组织和细胞营养状况的影响. 为期30 d的盐处理降低了群众杨和I-214杨根和茎组织中K+、Ca2+、Mg2+的水平,而对于叶片营养元素的水平基本没有影响. 与群众杨和I-214杨比较,胡杨组织的营养水平受NaCl的影响最小. 根皮层细胞X-射线微区分析的结果显示,NaCl降低了群众杨和I-214杨细胞壁和液泡中K+、Mg2+的水平,但对于胡杨细胞营养元素水平的影响较小. 实验结果表明,胡杨在盐胁迫条件下能保持对营养元素的吸收,维持较好的营养状况,这是其抗盐性强的原因之一;I-214杨和群众杨的抗盐性弱,与其胁迫条件下营养状况的恶化有关.  相似文献   

脱落酸和酚酸在红松种子休眠中的作用     

李金克  郑然  王沙生  魏刚 《河北林果研究》1996,(Z1)

应用高效液相色谱和气一质联用等分离、分析技术，研究了红松种子各部位中脱落酸和生长素以及外种皮酚酸含量在室温干藏、低温层积及１０％Ｈ＿２Ｏ＿２消毒不同条件下的变化。结果表明，红松种子各部位高含量的脱落酸在种子休眠中起着抑制萌发的作用。  相似文献   

GC-MS内标法定量分析植物组织中的JA、IAA和ABA   总被引：3，自引：1，他引：2  

李金克  陈华君  陈少良 《北京林业大学学报》2010,32(5):143-148

提出了利用气相色谱-质谱联用仪同时定量测定植物组织中茉莉酸(JA)、吲哚-3-乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)的方法。实验以欧洲灰杨叶片为材料,在用80%冷甲醇提取激素时,一并加入ABA、IAA和JA的内标(D3-ABA300ng,13C6-IAA60ng和DHJA80ng),激素提取液浓缩至水相,调pH2.5～3.0后经乙酸乙酯萃取、Sep-PakC18小柱纯化,甲酯化后,GC-MS定量测定ABA、JA。IAA经甲酯化后再经TMS化(三甲基硅烷化),用GC-MS定量测定。经检测:盆栽欧洲灰杨叶组织中脱落酸含量为120.170～128.771ng/g(鲜质量),茉莉酸含量为1.697～6.974ng/g(鲜质量),吲哚乙酸含量为4.990～14.776ng/g(鲜质量);脱落酸含量最高,其次是吲哚乙酸,茉莉酸含量最低。  相似文献   

胡杨PeREM1.3过表达提高烟草耐盐性的机制     

张会龙  武霞  尧俊  赵楠  赵瑞  李金克  沈昕  陈少良 《北京林业大学学报》2019,41(1):1-9

目的盐害作为一类非生物胁迫严重危害了农作物的生存以及产量。Remorin作为一类植物特有的蛋白质在植物适应环境过程中具有重要功能。本研究克隆了胡杨remorin蛋白PeREM1.3的编码基因PeREM1.3,并研究PeREM1.3基因在植物耐盐性中的作用。方法笔者将基因构件35S::PeREM1.3转入模式植物烟草中, 在盐胁迫条件下,通过生理生化的方法对表达PeREM1.3的转基因烟草进行基因功能的分析。结果研究显示PeREM1.3蛋白定位于细胞质膜上,其编码基因PeREM1.3的开放阅读框(ORF)长600 bp,编码199个氨基酸。胡杨中PeREM1.3能够响应盐胁迫和渗透胁迫表达上调。结果表明,在烟草中过表达PeREM1.3明显地提高了耐盐性。过表达PeREM1.3的烟草转基因株系中抗氧化物酶如SOD、POD和CAT活性显著提高,降低了活性氧水平,调控活性氧平衡。另外植物抗逆相关基因SOS1、HAK、NHA1、VAG1和PMA4的转录水平显著增高,调控K+/Na+平衡。结论这些结果说明PeREM1.3蛋白通过维持植物的活性氧平衡和K+/Na+平衡来提高植物的耐盐性。   相似文献   

长效杨树专用肥肥效试验     

周金池  魏刚  李金克  张小龙  高明望  丁尔刚  高一新 《林业实用技术》1999,(2)

本文通过在北京市林业局共青林场进行的杨树专用肥（颗粒和柱型）试验，对不同型态的专用肥同当地常规施肥和不施肥对照，对１年生杨树的胸径进行了比较，同时还对不同施肥量进行了研究。结果表明，对杨树的胸径以柱型肥料最好，施肥量以３支／株最佳。颗粒复混肥和柱型复混肥比常规施肥的胸径分别增加１２６５％和１６８７％；比不施肥分别增加７８７２％和８５４２％。本结果为在沙地上种植杨树并速生丰产提供了一项行之有效的措施，也表明柱型复混肥料在沙地上对防止沙地漏水漏肥具有明显的效果  相似文献   

胡杨PeAPY1和PeAPY2调控拟南芥耐盐机制研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

邓佳音  张艳丽  张一南  赵瑞  李金克  周晓阳  刘香芬  陈少良 《北京林业大学学报》2017,39(6):13-21

本文研究了胡杨apyrase基因(PeAPY1和PeAPY2)对植物耐盐性的影响。以PeAPY1和PeAPY2过表达拟南芥、拟南芥Atapy1和Atapy2突变体、野生型(WT)拟南芥及空载体(VC)为实验材料,研究盐胁迫条件下的植物根长、相对电导率、细胞活力、H₂O₂水平、eATP浓度、抗氧化酶活性的变化。研究结果显示:低盐浓度(50 mmol/L NaCl)对拟南芥各基因型的生长和生理生化指标没有显著影响;而高盐浓度(100 mmol/L NaCl)抑制了各株系的根长生长、细胞活力和抗氧化酶(超氧化物歧化酶/SOD、抗坏血酸过氧化酶/APX、过氧化氢酶/CAT)活性,却提高了相对电导率、H₂O₂水平和eATP浓度。但与Atapy突变体株系相比较,PeAPY过表达株系受高盐胁迫的影响较小。主要是由于PeAPY1/2的过表达提高了apyrase酶活,下调了eATP浓度及其诱发的活性氧水平,同时,过表达株系还通过保持抗氧化酶活性来抑制H₂O₂的水平,从而降低活性氧及其对膜脂的过氧化,保持了膜的稳定性、细胞活力和生长,最终提高了植物耐盐性。   相似文献   

不同营养条件下杨树与刺槐混交植株含氮量的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李金克  魏刚 《河北林果研究》1997,12(2):108-113

为探讨植物根系吸收过程中氮素亏缺与补给及其影响，１９９４￣１９９５年，通过沙培盆栽试验，研究了２ａ生杨树、刺槐及两者混植在全营养、缺氮、缺钾和缺磷条件下根、茎、叶中氮素营养的变化特性。结果表明：刺槐根含氮量２％￣３％，刺槐茎、叶以及杨树根、茎、叶含氮量均为０．１％￣１％，刺槐和杨树的含氮量均按根〉茎〉叶〉〉根面土分布。正常营养条件下，混交杨根面土含氮量约等于混交槐根面土含氮量〉纯槐根面土含氮量〉纯  相似文献   

脱落酸和酚酸在红松种子休眠中的作用   总被引：3，自引：0，他引：3  

李金克  郑然等 《河北林学院学报》1996,11(3):189-194

应用高效液相色谱和气-质联用等分离、技术技术，研究了红松种子各部位中脱落酸和生长素以及外种皮酚酸含量在室温干藏、低温层积及10%H2O2消毒不同条件下的变化。结果表明，红松种子各部位高含量的脱落酸在种子休眠中起着抑制萌发的作用。  相似文献   

胡杨悬浮细胞原生质体游离及质膜单离子通道测定     

陈少良  戴松香  李金克  王沙生  Andrea Polle 《中国林学(英文版)》2002,4(1):1-4

该文以胡杨 (Populuseuphratica)悬浮细胞为材料 ,利用 1 0 %纤维素酶“onozuka”R 10、0 0 1%果胶酶Y 2 3、0 15 %离析酶R 10和 0 1%半纤维素酶的混合酶液消化细胞壁 ,得到原生质体 .并利用膜片钳细胞贴附技术分别测到质膜内向和外向单通道电流 .通道电流在不同水平上变化 ,表明并非只有一种类型的通道开放 .树木细胞原生质体的分离以及利用膜片钳测定细胞质膜离子通道的成功实践为深入研究木本植物抗盐的细胞学机制奠定了基础  相似文献