伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩静芳  陈瑞爱  邵定勇  唐满华  梁桂益 《现代农业科技》2009,(15):308-310

以伪狂犬病毒为载体表达其他病原体抗原蛋白是伪狂犬病疫苗研究的一个重要方向。根据已发表的伪狂犬病毒（PRV）Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中。利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白（EGFP）的基因表达盒插入到缺失位点,并在下游引入1个多克隆位点,构建缺失通用转移载体PUC19TK-EGFP。用脂质体转染试剂盒将PUC19TK-EGFP和PRV-Ra株的基因组共转染BHK细胞,以EGFP为标记基因,用噬斑法得到纯化的重组病毒,命名为TK/EGFP,为研制以伪狂犬病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础。  相似文献   

PPV培养细胞的选择及在ST细胞中的增值规律     

唐满华  陈瑞爱  何玲  李春红  梁桂益  廖翠银  陈振波  同戈 《中国动物保健》2013,(11):19-23

猪细小病毒毒株在不同细胞系上的生长情况不尽相同,如不能掌握其规律,将难以生产出优质的疫苗.本研究对PPV（M2株）在PK15和ST细胞上生长情况进行了研究,得出ST细胞更适合其生长。之后将PPVM2毒株同步接种于ST细胞,用测定HA和TCID50的方法研究了其在ST细胞上增殖的基本规律。病毒在接种后24h可在细胞较稀的区域看到非常轻微的病变,病毒TCID50测定结果也表明,接毒后17h,病毒已经明显增殖。当病毒培养到约40h,其TCID50即接近高峰,并进入平台期,病毒的TCID50已达到10^7.5／0．hmL以上。继续培养,最高可达到10^8.5／0．1mL以上,且直到122h,也不见明显降低。病毒培养40-122h,不管是用Gibco血清还是用Hyclone血清培养病毒,其差异都非常小,变异系数都在5％以内。病毒HA价也出现同样的平台期,但HA价的平台期出现比TCID50的平台期出现更晚。  相似文献   

猪病毒性腹泻灭活疫苗对仔猪保护力研究     

何玲  钟采灵  王凤国  梁桂益  麦凯杰  孙华  陈瑞爱  黄红亮 《中国动物保健》2023,(12):108-109

PEDV引起的产房仔猪腹泻是目前危害养猪业的主要三大传染病（ASF、PRRS、PED）之一，给养猪业造成巨大的经济损失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。为了提高疫苗的保护效果，本研究小组对PEDV疫苗在病毒含量、佐剂等方面进行了大幅改进，本文总结了改进后的疫苗免疫怀孕母猪，初生仔猪从母猪乳汁获得被动保护的研究结果，表明该疫苗为产房仔猪PED的防控提供了更有效的措施。  相似文献