基于CMV启动子表达鹦鹉热衣原体PmpD-N蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建     

刘杉杉  孙伟  张稳  贾长青  罗杰  沈易华  郁建生  何诚 《动物医学进展》2018,(7)

为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白D的N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建HVT重组子,转染细胞获得HVT重组病毒,并在体外评价该重组病毒的相关特性。结果表明,转染细胞后成功获得HVT重组病毒。通过Western blot和IFA分析表明,重组病毒表达了PmpD-N蛋白。Confocal分析表明,PmpD-N蛋白分布在细胞的胞核、胞浆和细胞表面。HVT重组病毒的复制特性和野生型HVT一致。HVT重组病毒能够激活巨噬细胞促炎性细胞因子IL-6和NO的产生。该试验成功构建了含有CMV启动子,能够表达PmpD-N蛋白的HVT重组病毒,为下一步进行动物试验和分析该病毒的免疫效力奠定了基础。  相似文献   

梵净山紫苏紫苏醛的提取及其含量分析     

谭善财  袁波  黄珍  沈易华  雷茹淋 《安徽农业科学》2019,47(8):174-178

[目的]利用高效液相色谱测定梵净山4种紫苏(FMPF)茎、叶、果萼和籽4个部位中紫苏醛含量。[方法]在单因素试验结果的基础上,以甲醇为提取剂,紫苏醛提取率为响应值,对料液比、提取时间进行响应面法优化。其他固定条件为超声提取温度35℃,提取1次,频率40 kHz,功率300 W。以最佳条件提取、高效液相色谱测定4种紫苏4个部位中紫苏醛。[结果]最优条件:料液比1∶60、提取时间24 min;同一紫苏茎、叶、果萼、籽中紫苏醛含量均有显著差异(P<0.05),叶>果萼>茎>籽;4种紫苏叶、果萼紫苏醛含量差异显著(P<0.05);FMPF1(叶阔卵形、两面紫色、边缘锯齿浅)和FMPF4(叶卵形、两面紫色、具狭而深锯齿)紫苏叶中紫苏醛含量分别为7.537和6.139 mg/g,果萼中的含量分别为3.712和3.887 mg/g。[结论]梵净山紫苏(FMPF1、FMPF4)是提取紫苏醛的优质资源,同时提示紫苏醛含量与叶型具有一定的相关性。  相似文献   

激发高职高专学生生药学学习兴趣的策略     

刘冰  沈易华  唐文文 《河南农业》2018,(15)

当前,在高职高专生药学教学过程中,存在生药学所涉及的内容繁多、易懂难记、学生缺乏学习兴趣、实训条件有限、课程考核不合理等问题,结合高职高专教学的特点,就激发高职高专学生学习生药学兴趣的方法展开阐述,为今后在高职高专中开设生药学、对生药学的工作过程系统化开发奠定良好的基础。  相似文献