改进原位循环灌流法分离小鼠肝细胞研究     

潘君风  姜颖  贺福初 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2011,39(11):180-186

【目的】建立小鼠肝细胞分离原位循环灌流方法,为肝脏细胞蛋白质组研究提供技术技持。【方法】参考Seglen胶原酶两步原位灌流法,对其进行改进,建立原位循环灌流分离小鼠肝细胞方法,对小鼠肝脏进行原位循环灌流,离体消化肝脏组织,差速离心获得纯化小鼠肝细胞;台盼蓝拒染试验检测肝细胞活性,常规血球计数法计算肝细胞得率;利用显微形态观察、HE、PAS及免疫细胞化学等检测方法鉴定所获得的肝细胞纯度;用含体积分数20%FBS的RPMI-1640细胞营养液对原代小鼠肝细胞进行培养。【结果】建立了原位循环灌流分离小鼠肝细胞的方法,采用该方法可从每只小鼠肝脏中成功分选到细胞活性大于90%、纯度在95%以上的(4.2×107)～(6.5×107)个肝细胞。原代分离的小鼠肝细胞培养4h后,大多数细胞可贴壁,12h后贴壁完全,细胞呈伸张状态,该原代肝细胞可持续培养7d以上,且细胞形态状况良好。【结论】成功建立了小鼠肝脏原位循环灌流试验体系,获得了纯度和活性均较高的小鼠肝细胞,分选所得的小鼠肝细胞完全满足构建肝细胞蛋白质组表达谱试验的需要。  相似文献   

兽用快速诊断技术应用展望   总被引：1，自引：0，他引：1  

李旭  李哲斐  潘君风  张江波 《陕西农业科学》2006,(5):59-61

试剂盒作为一种特异、敏感、快速而且操作简便的检测手段在疾病诊断中占有非常重要的地位。其在人体外检测试剂市场所占的份额已达到35%,仅次于临床化学制剂所占市场份额。但在国内兽用体外检测市场上,试剂盒所占市场份额远未达到这一数字。故兽用试剂盒在我国仍有及其巨大的发展空间。基因芯片技术作为一项新技术在检测通量以及灵敏性、特异性上有着无可比拟的优势。其在畜禽疾病检测中的潜力同样很大。与此同时,由于我国兽医人才相对匮乏,正因如此广大农牧户对畜禽疾病的快速检测需求非常之高,这使得胶体金免疫层析快速诊断技术的大规模开发利用具备了良好的市场前景。  相似文献   

分子可视化技术在生物化学课程教学中的应用     

范三红  张斌  白娟  韩兆雪  肖亮  张大鹏  潘君风 《安徽农业科学》2017,45(4)

介绍了目前主要的分子可视化插件及技术特征,并以DS Visualizer ActiveX和JSmol为例,探讨了如何在PPT和网页中嵌入交互式分子可视化模块。旨在供高校生物化学和分子生物学教师参考,以激发学生的学习热情,提高教学质量。  相似文献