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为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促进树突细胞sCD83的释放。为研究PRRSV对猪树突细胞CD83表达的影响,用RT-PCR和流式细胞术分别检测了细胞CD83mRNA的水平和细胞膜CD83的含量。结果显示PRRSV可提高猪树突细胞CD83 mRNA的水平,然而对细胞膜CD83的含量影响不大,说明PRRSV促进sCD83释放的作用高于刺激CD83表达的作用,致使膜结合的CD83保持较低的水平。PRRSV诱导树突细胞sCD83的释放为探讨PRRSV感染引起免疫抑制提供了重要的线索。 相似文献
2.
为提高重组鸡白细胞介素-7(chIL-7)在真核细胞中的表达水平,本试验分析了影响基因表达的一些因素,包括转染方法、质粒用量、转染时间及表达时间等,对重组chIL-7表达水平的影响,并通过正交试验设计方法确定了利用HEK293T细胞表达重组chIL-7的最适表达条件。结果表明,在T75细胞瓶中,由脂质体介导使用30μg质粒,转染4h,表达48h和由磷酸钙介导使用40μg质粒,转染6h,表达60h可以获得较高的表达效率,表达水平分别为(124±9)和(94.3±8)μg/106个细胞。本结果为进一步研究chIL-7的功能提供有利条件。 相似文献
3.
犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白.利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应.为进一步提高VP2 DNA疫苗的免疫活性,本实验利用犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因作为生物佐剂研究其对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫增强作用.首先通过RT-PCR方法从犬淋巴细胞中扩增GM-CSF基因,并将其插入到pcDNA3.1栽体上,分别构建该基因的两个分泌型真核表达载体,即非融合表达载体pcDNA-cGMCSF和与Myc His融合的表达栽体pcDNA-cGMCSF/MH.用pcDNA-cGMCSF/MH载体转染HEK293T细胞以确定GM-CSF基因能否在真核细胞中进行分泌表达.然后用本室构建的VP2基因表达栽体单免疫小鼠,用VP2表达载体与pcDNA-cGMCSF共免疫小鼠(pcDNA3.1空载体作为阴性对照).免疫后用ELISA方法检测不同时间小鼠血清的抗体水平.用MTT法检测小鼠免疫后35 d时淋巴细胞的增殖活性,同时用ELISA试剂盒检测小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平.结果表明,本试验构建的表达载体能够介导重组GM-CSF在真核细胞中进行分泌表达.免疫实验表明,利用GM-CSF基因与VP2基因共免疫小鼠,抗体的水平明显高于VP2基因单免疫组(P＜0.01).共免疫组小鼠淋巴细胞的刺激指数和γ干扰素的表达水平均明显高于单免疫组(P＜0.05).由此可见,GM-CSF表达载体可明显提高CPV VP2 DNA疫苗的免疫应答水平. 相似文献
5.
试验旨在研究全株青贮张杂谷不同比例替代全株青贮玉米对奶牛产奶量和乳品质的影响。选取胎次2～3胎、体重为600 kg左右的荷斯坦高产泌乳牛40头,随机分成4组,每组10头。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别为试验组,在基础日粮上分别用2.3、4.6 kg和6.9 kg全株青贮张杂谷替代原有日粮中10%、20%和30%的全株青贮玉米。预试期5 d,正式期30 d。结果表明,产奶量和乳品质各组差异均不显著(P>0.05),但产奶量和乳品质均表现出Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组高于Ⅰ组,且产奶量Ⅱ组最高,Ⅲ组次之;乳脂率、乳蛋白率Ⅳ组均最高,分别比Ⅰ组提高0.14和0.1个百分点;乳糖率Ⅱ组最高,比Ⅰ组提高0.03个百分点;非脂固形物Ⅱ组和Ⅳ组最高,比Ⅰ组提高0.08个百分点;灰分各试验组均比Ⅰ组提高0.01个百分点;尿素氮和体细胞数Ⅳ组均最低,比Ⅰ组分别降低0.36 mmol/l和24.76×10~3个/ml。在本试验条件下,综合考虑产奶量、乳品质及经济效益,全株青贮张杂谷替代原有日粮中10%的全株青贮玉米饲喂效果较好,净收益每天每头牛增加4.42元。 相似文献
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