菜豆荚斑驳病毒免疫捕获一步RT-PCR检测     

沈建国  王念武  高芳銮  黄可辉  郭琼霞 《勤云标准版测试》2009,29(1)

【研究目的】建立快速、准确、简便的检测大豆种子上菜豆荚斑驳病毒的免疫捕获一步RT-PCR方法(一步IC-RT-PCR)。【方法】采用抗原捕获和一步RT-PCR相结合的方法,并通过反应条件优化,确定一步IC-RT-PCR的反应程序,同时对该方法的特异性及实际检测效果进行验证。【结果】成功建立了一步IC-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒方法,能够从感染菜豆荚斑驳病毒的大豆种子上扩增出预期大小的特异性片段,而对其他病毒及健康大豆无特异性反应;应用该方法对不同产地大豆种子样品进行检测,结果从来自美国的大豆样品中检出菜豆荚斑驳病毒,检出率为50%。【结论】一步IC-RT-PCR方法可以快速、准确地检测大豆种子上的菜豆荚斑驳病毒,适用于口岸检验检疫。  相似文献   

不同茶园假眼小绿叶蝉抗药性比较   总被引：9，自引：0，他引：9  

王念武  徐金汉  陈峥  翁慧  张灵玲  关雄 《福建农林大学学报(自然科学版)》2004,33(2):169-173

假眼小绿叶蝉Empoascavitis(Gothe))是我国茶区的主要害虫.本文采用药膜法测定了14种杀虫剂对该虫相对敏感种群的毒力基线,比较了6种常用农药在不同茶园的抗性差异.结果表明,随着茶园施药水平的提高,其LC50值和抗药性逐渐增强,对新型药剂阿克泰的抗性倍数增幅最大,增长了2.2-13.3倍,而对高效氯氰菊酯的则增幅最小,增长了1.5-3.4倍.毒力基线测定结果表明:敌敌畏的LC50值为310.5990mg·L-1,毒力最低;阿克泰的LC50值为1.2029mg·L-1,毒力最高,相对敌敌畏的毒力为258.2倍.  相似文献   

TC/IC-RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒     

沈建国  林双庆  蔡伟  李海明  王念武  翁瑞泉  黄可辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》2012,41(1):13-17

根据GenBank上登录的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)和免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行检测.结果表明,TC-RT-PCR和IC-RT-PCR均具有良好的特异性,检测灵敏度分别比DAS-ELISA高10和100倍;通过对一批进境黄瓜样品的检测,验证了2种检测技术的实际应用效果.因此,本研究建立的TC-RT-PCR和IC-RT-PCR检测技术,可有效应用于CGMMV的快速检测.  相似文献   

PCR方法检测美人蕉黄斑驳病毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

沈建国  王念武  张东斌  黄可辉  郭琼霞 《植物检疫》2008,22(5)

美人蕉黄斑驳病毒病是危害美人蕉的重要病害之一,我国目前尚无该病发生的报道.本文以健康和感病植株为材料,进行总DNA的提取和PCR扩增,从感病植株中扩增出与目的片段大小相符的产物,而健康植株中则未扩增出.PCR扩增产物经克隆、测序后证实,与已报道的美人蕉黄斑驳病毒(Cannayellow mottle virus,CaYMV)序列同源性高达97%～99%.经优化反应条件,建立了稳定的美人蕉黄斑驳病毒PCR检测方法.  相似文献   

香蕉细菌性枯萎病菌超分支滚环扩增快速检测技术     

王念武  陈劲松  沈建国  黄振  翁瑞泉 《亚热带农业研究》2015,(1):1-5

根据香蕉细菌性枯萎病菌(Ralstonia solanacearum race 2)的特异插入序列ISRso19设计滚环扩增的锁式探针,并对超分支滚环扩增的反应条件进行优化,建立了香蕉细菌性枯萎病菌超分支滚环扩增技术。结果表明,该检测技术能够从供试的9种病原菌中特异性地检测出香蕉细菌性枯萎病菌,检测的DNA最低浓度为500 fg·μL-1,高于常规PCR的灵敏度。  相似文献   

福建口岸从英国进境水仙种球上截获南芥菜花叶病毒和水仙潜隐病毒     

沈建国  李敏  虞赟  王念武  连德福  林阳武 《植物检疫》2012,(2):63

2011年11月,福建出入境检验检疫局技术中心对一批英国进境水仙种球进行检疫,采用ELISA初筛,RT-PCR及序列测定确认的方法,从中同时检出南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)和水仙潜隐病  相似文献   

桔小实蝇在中国的适生性研究   总被引：8，自引：0，他引：8       下载免费PDF全文

詹开瑞  赵士熙  朱水芳  周卫川  王念武 《华南农业大学学报》2006,27(4):21-25

对桔小实蝇Bactrocera dorsalisHendel在中国的适生性进行了研究,结果表明,该虫的世代发育起点温度和有效积温分别为10.675 7℃、501.724 0日度.根据桔小实蝇的致死温度、有效积温和生物气候相似距,构建了桔小实蝇适生性分析计算机模型.用中国670个气象站30年的气候资料运行该模型,将桔小实蝇在中国的定殖风险区划分为高度危险区、危险区、轻度危险区和安全区,分布北界为(30±2)°N,适生区面积占全国的31.64%,1年发生3~11代,以4~8代为主.  相似文献   

福建口岸首次截获玉米褪绿斑驳病毒和玉米矮花叶病毒     

沈建国  郑荔  王念武  虞赟  李敏  连德福  林阳武 《植物检疫》2011,(5)

2011年4月,福建出入境检验检疫局技术中心植物检疫实验室采用DAS-ELISA、RT-PCR及序列测定验证的方法,从一批阿根廷进境玉米种子上同时检出玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)和玉米矮花叶病毒(Maize dwarfmosaic virus,MDMV)。这是福建口岸首次检出上述2种病毒。  相似文献   

小麦矮腥黑粉菌检疫鉴定研究进展和展望     

林授锴  王念武  翁瑞泉  周卫川  郭琼霞 《植物检疫》2008,22(5)

小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversa Kuhn,简称 TCK)是我国十分重要的对外检疫性有害生物,是麦类腥黑穗病中危害最大、极难防治的病害之一.本文主要综述了近年来对其检疫鉴定的研究进展,并对其发展方向进行展望,以期为实现准确、快速地鉴定提供帮助.  相似文献   

加拿大进境大豆上检出菜豆荚斑驳病毒     

沈建国  王念武  翁瑞泉  黄可辉  郭琼霞 《植物保护》2009,35(6):127-129

本研究采用DAS ELISA、IC RT PCR及序列测定方法,对加拿大进境大豆种子进行菜豆荚斑驳病毒（Bean pod mottle virus, BPMV）和大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）检测,结果表明,BPMV的DAS ELISA和IC RT PCR检测结果均为阳性,且PCR扩增产物序列与已报道的BPMV基因序列相似性达97%以上,而SMV的DAS ELISA和IC RT PCR检测结果都为阴性。综合血清学、分子生物学检测结果,确认该批大豆携带有菜豆荚斑驳病毒。  相似文献