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跨膜蛋白66(TMEM66)是与细胞凋亡以及癌症发生密切相关的重要功能基因,为了在个体水平研究其生物学功能,我们进行了TMEM66基因突变体(TMEM66V)转基因小鼠的构建。本研究通过原核注射法进行转基因操作,将获得的312个受精卵移植到13只代孕母鼠中,运用PCR、Southern blotting对出生的小鼠进行转基因鉴定,对于转基因阳性小鼠通过传代试验研究外源基因是否稳定整合,并通过反向PCR方法研究外源基因的整合方式。结果显示在出生的55只小鼠中有6只为转基因阳性,其中3只转基因小鼠可以稳定传代,表明这些小鼠中外源基因发生了稳定整合。反向PCR检测结果发现外源片段是以串联重复的方式整合到转基因小鼠的基因组中。本研究成功构建了TMEM66基因突变体转基因小鼠,为进一步研究TMEM66基因的功能奠定了基础。 相似文献
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对家养动物遗传育种中的代谢组学进行分析,为通过代谢组学进行动物经济性状遗传基础的研究提供依据。 相似文献
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转基因小鼠的多重PCR快速检测技术 总被引:3,自引:0,他引:3
转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持.采用碱裂解法快速提取鼠尾基因组DNA,用PCR方法检测其中的外源基因结构如cytomegalovirus(CMV)启动子、hGH polyA终止子及目的基因跨膜蛋白66(Transmembrane protein 66,Tmem66),筛选到阳性样品.优化了多重PCR引物退火温度及缓冲液浓度,并探讨了扩增速率对多重PCR的影响.结果表明,此多重PCR方法可得到很好的扩增效果,可用于转基因小鼠外源基因的检测,同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考. 相似文献
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本试验旨在研究肉鸡饲粮中添加不同比例猴头菇多糖(HEP)对热应激肉鸡生长性能、血液生理生化指标、免疫和抗氧化功能及物质代谢的影响。试验选用144只健康28日龄白羽肉鸡,随机分为6个组,每组3个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。常温对照组和热应激组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别在基础饲粮中添加0.4%、0.8%、1.2%和1.6%的HEP。常温对照组肉鸡饲养于温度为(21±1)℃和相对湿度为(60±5)%的环境中,热应激组和试验组每天给予12 h热应激。试验期14 d。结果表明:1)与常温对照组相比,热应激会显著降低肉鸡平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P <0.05),显著提高料重比(F/G)(P <0.05),显著降低血液白细胞(WBC)数量、红细胞(RBC)数量和血红蛋白(HGB)含量以及血清白蛋白(ALB)含量(P<0.05),显著提高血清热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α含量(P<0.05),显著降低血清白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)... 相似文献
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