双表达去势DNA疫苗的构建及其稳定性研究     

许学林  杨波  荆焕松  胡映红  王风华  孙培皓  熊家军 《中国畜牧兽医》2021,48(5):1745-1754

试验旨在构建一种更安全有效的新型免疫去势DNA疫苗,通过选取下丘脑-垂体-性腺轴（hypot halamic-pituitary-gonadal axis,HPG）的上游调控基因吻素1（KISS1）和促性腺激素释放激素（GnRH）作为靶标,借助2A肽的自剪切功能,引入平衡致死系统代替抗性基因筛选流程,成功将GnRH和KISS1转入非抗性筛选质粒pVAX-asd中,酶切验证和测序对比验证目的基因的插入方向和序列完全正确。重组质粒转染HeLa细胞,反转录后扩增目的基因结果显示,重组质粒在真核细胞内能够正常转录,保证重组质粒在导入机体后能够正常表达,从而引起特异性免疫反应。将构建成功的质粒转入减毒的猪霍乱沙门氏菌C500中,获得可直接口服免疫的活载体疫苗,酶切和测序结果表明,双表达重组质粒成功导入工程菌中。将活菌疫苗在体外连续传代50次,选取0、2、5、10、20、30、40、50代的菌株进行稳定性研究,生长曲线检测结果表明,工程菌在体外连续传代50次的过程中,其生长特性无明显变化,且与减毒猪霍乱沙门氏菌C500的生长特性一致,未因携带质粒发生明显变化;同时将各代菌液扩增沙门氏菌标志基因（invA）和毒力基因（crp）,结果表明多次传代后工程菌仍然具有沙门氏菌的特性,其减毒特性也无变化。各代菌液质粒酶切验证显示,多次传代并不影响质粒的稳定性,重组双表达质粒能够在沙门氏菌C500中维持正常拷贝功能。综上所述,该重组质粒和工程菌疫苗均具有良好的稳定性,可直接应用于动物免疫去势的研究。  相似文献   

肉种鸡饲喂特点     

王风华 《中国畜禽种业》2012,8(1):131-131

肉用种鸡最基本的饲喂特点是将有限的饲料均匀地投喂给所有的鸡,目的是使整个鸡群每个体体重保持一致。种鸡实行群体饲养并且使用一种饲喂模式饲喂,如果鸡群的体重差异性很大,必然会造成一些鸡只采食不足,而另一些些鸡只采食过量,从而影响到鸡群的产蛋率、精液质量以及种蛋受精率、孵化率、出雏成活率。  相似文献   

套袋红富士苹果黑点病轻重与套袋前喷药及纸袋质量的关系     

周建维  周丽霞  杨兴华  张成君  王风华 《落叶果树》2003,35(6):45-46

红富士苹果黑点痛的轻重与谢花后喷药及果袋质量关系密切。谢花后至套袋前喷3-4次800倍大生M45加多菌灵及甲基托布津，两次喷药间隔10天，喷药后套优质纸袋。可有效防止黑点病的发生。  相似文献   

"鸡腿菇201"高产栽培技术     

吴敬芹  李吉刚  马腾飞  王风华 《农村新技术》2003,(1):12-13

鸡腿菇又名毛头鬼伞,"201"是我园从野生菇体组织分离而成,经栽培出菇,生物转化率可达100～140.  相似文献   

日光灯架为什么会冒烟?     

王风华 《农村电工》1996,(7)

我单位有一座三层教学楼,照明电源由电杆引下来的三火一零四根线接入总开关,从开关出来经一段架空线路进入了一楼穿墙套管.三相火线从一楼分路,每相分别进入一个楼层配电板上的三相闸刀.1996年1月的一天,却出现了异常现象.  相似文献