生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达及纯化     

赵欣  刘会珍  罗为桂  苏益  蔺万煌 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2013,39(6):609-614

以pGEX–KG为骨架,运用分子克隆方法构建了生长素结合蛋白AtTIR1和 IAA28的原核表达载体,通过转化不同表达菌株探索了2种蛋白的诱导表达条件。结果表明：在0.4 mmol/L IPTG诱导下,GST–IAA28融合蛋白在表达菌株Tuner中的表达量最高,其适宜诱导温度为16 ℃;在0.6 mmol/L IPTG诱导下,BL21(DE3)中GST–IAA28的表达量最高;在各种浓度的IPTG诱导下,Rosetta中的GST–IAA28的产量均不高;在25 ℃和0.4 mmol/L IPTG诱导条件下,Rosetta中的GST–AtTIR1表达总量最高,每克细菌可诱导出约0.2 mg的目标蛋白,但BL21(DE3)菌种中的GST–AtTIR1表达量很低。利用GST SefiroseTM resin亲和树脂对表达的蛋白进行纯化,获得了较纯的AtTIR1和IAA28蛋白。  相似文献   

拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析     

刘会珍  罗为桂  谢伟民  胡月清  苏益  萧浪涛  蔺万煌 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2015,41(2):143-148

以p GEX–KG为基本骨架,构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体,用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达,利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白,并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明:GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好;蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间,最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质。  相似文献   

普通商陆耐锰特性研究及除锰能力评估     

罗为桂  刘四喜  段海风  刘会珍  苏益 《湖南农业科学》2012,(23):42-44,48

以采自普通土壤生长的商陆为研究对象,对商陆的耐锰特性和锰在商陆体内的积累特征进行了研究。结果表明:(1)普通商陆对锰亦具有较强的耐受性。当土壤中锰离子含量低于24 mmol/L时,锰离子对商陆的生长都具有促进作用,在18 mmol/L左右达到最大促进效果;当土壤中锰离子含量超过24 mmol/L时,商陆的生长受到明显的抑制。(2)锰主要在商陆叶中积累,商陆的除锰能力约为3 400~85 600 g/hm2。  相似文献   

1个玉米高亲和K~+转运体HKT的生物信息学分析     

陈靓靓  罗为桂  刘清  苏益 《湖南农业科学》2012,(19):22-24,28

植物HKTs具有Na(+或K+)单向运输或Na+-K+共转运功能。利用各种生物信息学工具分析了1个从玉米中获得的HKT的氨基酸序列,并预测了其功能。结果表明:目标蛋白属于HKT的亚家族I,与OsHKT1;5和TaHKT1;5蛋白进化关系较近,命名为ZmHKT1;5。该蛋白呈弱碱性,疏水性较强,具有8个跨膜结构,其二级结构含58.67%α螺旋(H),7.07%β折叠(E)和34.26%无规卷曲(L),三级结构为典型的膜蛋白。推测该蛋白可能具有Na+选择性并在玉米的耐盐机制中起作用。  相似文献