Red同源重组技术在大肠埃希菌基因敲除中的应用     

吴程华  严玉霖  高洪  谭锐  董骎 《上海畜牧兽医通讯》2015,(1)

近年来,大肠埃希菌一直是分子生物学和基因组学的重要研究对象。20世纪80年代以来,生物学家发展了一种新型分子生物学技术-基因敲除。大肠埃希菌基因敲除技术发展迅速,各种新型技术的出现使得其基因组的改造较以往更为快速、简单,尤其是Red同源重组技术在大肠埃希菌基因敲除中的应用已经越来越成熟。本文简要综述了利用Red同源重组技术进行大肠埃希菌基因敲除的原理、策略及应用现状。  相似文献   

泛素基因沉默对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响     

刘超英  董骎  高洪  严玉霖  富国文  单春兰 《江苏农业科学》2019,47(8)

为了探讨泛素(ubiquitin,简称Ub)对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响,通过脂质体将短发夹RNA(shRNA)质粒转染猪小肠上皮细胞,使其泛素基因沉默,于转染后6、12、24、48 h收集细胞及其上清。应用荧光定量PCR检测细胞内TLR4/NF-κB信号通路中关键分子TLR4、NF-κB、MyD88、IκB-α的mRNA表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB、IκB-α及炎性因子TNF-α、IL-1含量的变化。结果显示,shRNA质粒有效地抑制了泛素基因的表达,转染shRNA质粒后,TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、MyD88和IκB-α的mRNA表达量及NF-κB、IκB-α、TNF-α和IL-1含量均普遍呈下降的趋势,说明泛素在炎性因子的释放中起着至关重要的作用,泛素基因的沉默能够抑制该通路的活化。  相似文献   

云南省楚雄地区猪蓝耳病抗体水平调查     

谭锐  高洪  严玉霖  赵汝  刘欢欢  董骎  吴程华  杨培昌 《上海畜牧兽医通讯》2015,(2):40-41

为了了解猪蓝耳病(PRRS)在楚雄地区散养户和规模化猪场中的免疫水平情况,从楚雄9个地区随机采集了230份血清样品,采用间接ELISA方法对血清样本进行PRRS抗体检测。结果显示,230份血清样品中,阳性数为160份,总体阳性率为69.6%,其中,抗体弱阳性样本89份,占38.7%,抗体强阳性样本71份,占30.9%。  相似文献   

云南省楚雄部分地区猪场猪瘟血清学调查     

董骎  高洪  严玉霖  赵汝  吴程华  刘欢欢  谭锐  杨培昌 《上海畜牧兽医通讯》2015,(1)

为了解云南省楚雄地区猪瘟(CSF)的感染情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对楚雄州部分地区规模化猪场和散养户饲养猪的283份血清样品进行猪瘟抗体检测。结果表明,楚雄地区规模化猪场和散养户的猪瘟抗体阳性率为56.89%,其中规模化养殖场为71.77%,散养户为14.86%。从检测结果来看,部分猪场猪瘟免疫效果不理想,今后还需加大免疫力度,从而达到更好的免疫保护。  相似文献