Asia Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因和牛α-干扰素基因的融合表达   总被引：1，自引：1，他引：1  

独军政  常惠芸  宋立荣  李冬  丛国正  林彤  邵军军  刘在新  谢庆阁 《中国兽医科技》2005,35(2):81-84

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒YNBS／58株VP1基因和去信号肽的牛α-干扰素基因共同亚克隆于原核表达载体pET-28a中，转化BL21后经IPTG诱导，实现了重组融合蛋白VP1-BoIFN—α-在大肠埃希氏茵BL21中的高效表达，表达产物经SDS—PAGE和western-blotting分析，重组的VP1-BoIFN—α蛋白分子质量约为46ku，与预期大小相符。薄层扫描分析显示，重组蛋白VP1-BoIFN—α的表达量占茵体总蛋白的30％，且以包涵体的形式存在。包涵体提取物用8mol／L尿素溶解后，在变性条件下利用Ni—NTA柱对VP1-BoIFN—α-融合蛋白进行了纯化。  相似文献   

非洲猪瘟诊断技术研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

高瞻  张光磊  邵军军  常惠芸 《中国动物检疫》2019,36(9):63-68

非洲猪瘟是猪的一种急性、高度接触性传染病,致死率可达100%。本文综述了非洲猪瘟病原学和血清学诊断技术研究进展,包括红细胞吸附试验(HAD)、聚合酶链反应技术(PCR)、环介导恒温扩增技术(LAMP)、荧光抗体技术(FAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金快速免疫层析技术(GICA)等,并对各种方法的优缺点进行简要汇总分析,总结认为今后非洲猪瘟诊断的发展趋势在于不同诊断技术的联合应用。  相似文献   

利用Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白的单克隆抗体建立单抗竞争ELISA方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

林彤  邵军军  丛国正  独军政  高闪电  常惠芸  谢庆阁 《安徽农业科学》2009,37(23):11025-11026

应用纯化的Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白作为抗原,采用过碘酸钠法标记纯化的单抗,建立了单抗竞争ELISA,检测10份阳性猪口蹄疫血清及200多份阴性血清,试验结果与样品的背景相一致。敏感性试验和重复试验结果表明,该方法具有稳定和敏感等特性,适合Asia1型猪口蹄疫病毒抗体的监测。  相似文献   

3种口蹄疫病毒检测方法能力比对的试验   总被引：2，自引：1，他引：1  

刘萍  丛国正  邵军军  林彤  独军政  常惠芸 《浙江农业科学》2009,(1):195-197

为验证口蹄疫病毒的检测方法,利用液相阻断酶联免疫吸附试验（LB-ELISA）、非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验（3ABC-I-ELISA）和反转录聚合酶链反应（RT-PCR）3种方法对样品进行口蹄疫病毒检测,检测结果待检样品为阴性,阳性对照与预测结果一致。  相似文献   

抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体轻链可变区的克隆及序列分析     

宋帅  林彤  邵军军  丛国正  独军政  高闪电  常惠芸 《浙江农业科学》2009,(4):809-811

应用分子生物学技术,从分泌抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞9F12中提取总RNA,经反转录,PCR扩增及克隆,得到VL基因。序列测定结果表明,9F12的VL基因为336 bp,可编码112个氨基酸。用NCBI GenBank分析表明,VL基因符合小鼠抗体可变区特征,为功能性重排的抗体可变区基因。根据Kabat分类体系,9F12的VL基因片段隶属于抗体κ轻链20家族。9F12的VL基因的克隆为抗O型口蹄疫病毒单链抗体的构建与表达奠定了基础。  相似文献   

干扰素作用机制及其在抗口蹄疫病毒中的应用研究进展   总被引：1，自引：1，他引：0  

孙静静  邵军军  常惠芸 《中国畜牧兽医》2012,39(1):206-209

干扰素(interferon,IFN)是人和动物细胞受到适宜刺激产生的一种微量的、具有高度生物学活性的糖蛋白,是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抗多发性硬化、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子。自20世纪50年代末发现干扰素以来,相关研究取得了巨大进展。文章综述了干扰素的抗病毒机制及其在抗口蹄疫病毒中的应用进展。  相似文献   

1—2月龄荷斯坦奶牛不同组织中FMDV受体亚基αv、β3、β6 mRNA转录水平的相对定量研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

独军政  常惠芸  薛霜  高闪电  丛国正  邵军军  林彤  包慧芳  才学鹏 《中国农业科学》2010,43(3):605-611

【目的】建立检测牛口蹄疫病毒(FMDV)受体亚基αv、β3、β6 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析受体αvβ3和αvβ6在不同器官组织中的转录水平。【方法】在对牛FMDV受体基因克隆和测序的基础上,设计实时定量PCR引物,以GAPDH为内参基因,采用△△Ct相对定量PCR方法检测分析FMDV受体亚基αv、β3、β6 mRNA在1—2月龄荷斯坦奶牛体内不同器官组织中的转录表达谱。【结果】αvβ3在荷斯坦奶牛24种组织中均有不同程度的转录表达;αvβ6在甲状腺、硬腭、鼻内皮、喉头、肺、食管、肾、后蹄冠状带等组织表达量较高,在唇、舌皮、软腭、气管、心脏、瘤胃、直肠、前蹄冠状带等组织转录表达量适中,在唾液腺、下颌淋巴结、肝、脾、肌肉等组织未检测到表达;αvβ6在牛体内的表达分布与FMDV组织嗜性基本一致,αvβ6受体可能是决定FMDV组织嗜性的主要功能受体,αvβ3的组织分布似乎与FMDV组织嗜性无关,但不能排除αvβ3在病毒感染过程中的作用。【结论】建立了检测FMDV受体亚基mRNA在不同器官组织中表达水平的相对实时定量PCR方法。  相似文献   

利用Asia 1型口蹄疫病毒VP1蛋白的单克隆抗体建立单抗竞争ELISA方法(英文)     

林彤  邵军军  丛国正  独军政  高闪电  常惠芸  谢庆阁 《（《农业科学与技术》）编辑部》2009,(3)

Using the purified VP1 protein of Asia 1 type foot-and-mouth disease virus as the antigen, the purified monoclonal antibody was labeled by the sodium periodate method and the monoclonal antibody competitive ELISA was established in this study. Ten positive porcine foot-and-mouth disease serums and more than two hundreds negative serum were tested, and the results were the same as the background of samples. The sensitivity test and replicate test indicated that this method was stable and sensitive, which was suitable for monitoring Asia 1 type porcine foot-and-mouth disease virus antibody.  相似文献   

口蹄疫新型疫苗研究进展     

陈建文  邵军军  常惠芸 《畜牧与兽医》2012,44(10)

口蹄疫在流行区域的持续感染,影响了以家畜为生计的人们的正常生活,这经常发生在资源缺乏的发展中国家。由于口蹄疫所带来的危害,世界动物卫生组织以及粮农组织呼吁对于口蹄疫病毒在全球范围内进行控制以及消除。然而,由于目前所使用的灭活疫苗并不能满足此要求,因此需要研制新型疫苗满足口蹄疫的全球性防护及消除。本文主要介绍了DNA疫苗、病毒样衣壳疫苗、病毒载体疫苗、cDNA源性灭活疫苗以及修饰的活疫苗等新型疫苗的研究现状以及在临床中的应用前景。  相似文献   

牛口蹄疫病毒受体β6亚基的基因克隆和分子特征   总被引：1，自引：0，他引：1  

独军政  常惠芸  丛国正  邵军军  林彤  刘在新  刘湘涛  才学鹏  谢庆阁 《中国兽医学报》2008,28(4):363-368

从口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）感染康复牛的舌皮组织中克隆到了β6亚基基因并对其核苷酸序列和推导的氨基酸进行了比较分析。牛β6基因的编码区含有2367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,其中信号肽由26个氨基酸组成（1～26aa）;胞外域由681个氨基酸组成,含有10个潜在的糖基化位点（NXT/NXS）和51个半胱氨酸（Cys）残基;跨膜区由29个氨基酸组成（708～736aa）;胞浆域由52个氨基酸组成,含有1个NPLY核心基序,该基因在GenBank中的登录号为DQ867017。牛β6基因与羊、猪、人、小鼠、挪威大鼠β6基因的核苷酸序列同源性分别为97.0%、91.6%、88.6%、82.5%和82.7%,推导的氨基酸序列同源性分别为97.1%、93.7%、93.0%、89.2%和89.2%。口蹄疫病毒自然宿主（牛、羊、猪）的β6亲缘关系较近,提示β6亚基可能与口蹄疫病毒的宿主范围有关。  相似文献