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为了了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性.用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因.选用限制性内切酶HincⅡ和EcoRⅡ对分离的O157:H7菌株eaeA基因进行酶切,选用限制性内切酶HaeⅢ、HinfⅠ、EcoRⅡ和RsaⅠ对分离的O157:H7菌株chxA基因进行酶切,最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析.结果,所有O157:H7菌株扩增出eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,但没有扩增出stx1和stx2基因;4株O157:H?菌株,均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,且只有1株扩增出stx1基因.所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同.结果表明,由于所有菌株缺失stx2基因,其致病力相对较低,且在基因水平较为保守,多态性较为单一. 相似文献
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产志贺毒素大肠杆菌stx2a和stx2b的血清和牛奶抗体检测 总被引：2，自引：0，他引：2
于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清（牛奶）中的stx2a和stx2b抗体．用P／N〉2．1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份（3．93％）;415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份（0．96％）,stx2b抗体阳性血清2份（0．48％）;326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份（7．46％）,stx2b抗体阳性血清21份（6．44％）．牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低．由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因． 相似文献
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幽门螺杆菌cagT蛋白的表达、纯化及免疫原性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了解析cagT蛋白的结构,进而了解cagT基因在幽门螺杆菌致病中的作用,应用PCR技术从幽门螺杆菌26695菌株基因组中扩增cagT基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)栽体,转化宿主细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白,免疫家兔制备抗体并鉴定其抗原性.成功克隆cagT基因,重组cagT基因片段的测序结果与GenBank上公布的序列相同.重组cagT蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,免疫家兔所得的抗体滴度为1:32.结果构建了高效表达cagT蛋白的重组载体pET-28a(+)-cagT,表达的蛋白具有良好的免疫原性,为后续的结构和功能研究奠定了基础. 相似文献
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于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清(牛奶)中的stx2a和stx2b抗体.用P/N2.1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份(3.93%); 415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份(0.96%),stx2b抗体阳性血清2份(0.48%);326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份(7.46%),stx2b抗体阳性血清21份(6.44%).牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低.由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因. 相似文献
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采集重庆市及三峡库区6个区县家畜粪便样品1 473份,接种mEC＋n增菌肉汤37℃振摇孵育6 h,取增菌液接种CT-SMAC平板,37℃培养18 h,挑取可疑菌落,经血清学检验、PCR扩增和微量生化实验确认,最后用药敏试纸测试其对常用抗生素的敏感性。结果表明,在1 473份粪便样品中共检出11株O157,其中7株O157：H7,4株O157：H？;对分离菌株做药物敏感性试验,发现它们对青霉素、氨苄西林、杆菌肽、头孢呋肟、红霉素、庆大霉素、四环素等存在不同程度的耐药。这次调查为重庆市及三峡库区该病的预防提供了依据。 相似文献
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应用斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA,简称斑点试验)能检出少至0.58ng/ml的犬细小病毒的病毒抗原,比常规ELISA及HA试验分别敏感8及64倍,与犬腺病毒等5种对照病毒不发生交叉反应,与病毒分离试验的阳性符合率为94.44％(17/18),比常规ELISA及HA试验提前24～48h检出实验感染犬粪中排毒。采用斑点试验、常规ELISA、HA试验三种方法对316份犬粪标本进行了检测比较,阳性率分别为33.23％、27.85％、23.10％(P<0.05)。该法可在4h内报告结果。 相似文献
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