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CD4基因是质膜上的转运系统之一,为动物辅助性T细胞(TH)和部分胸腺细胞的共受体与信号传导分子,参与TCR介导的TH细胞活化和胸腺细胞分化过程.该研究首次克隆了山羊CD4基因(GenBank登录号:EU913093),并分析了该基因的组织表达情况.结果表明:所克隆的山羊CD4全长cDNA序列为1 555bp,开放阅读框(ORF)为1 368bp,编码455个氨基酸的蛋白,相对分子质量为5.05×104,等电点为9.52.山羊CD4蛋白前体由信号肽、胞外区、跨膜区和胞浆区4个部分构成.胞外区含有4个Ig样结构域,2个二硫键(C41—C109和C143—C180)及3个N糖基化位点(N231,N263和N343).氨基酸序列比对表明山羊CD4与绵羊CD4的氨基酸相似性为98%,与猪、人、兔、狗、猫、蝙蝠以及小鼠的氨基酸相似性分别为81%,74%,73%,72%,70%,70%和66%.系统发育树表明山羊CD4与绵羊和猪的CD4蛋白聚成一支,表明它们有较近的亲缘关系,其中山羊与绵羊的亲缘关系最近,而与狗、蝙蝠、兔、人和小鼠的亲缘关系相对较远.实时荧光定量PCR分析发现,CD4在山羊淋巴中的表达量最高,在睾丸中表达量较低,表明山羊CD4是一种免疫分子. 相似文献
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为探讨蜂王浆主蛋白(MRJPs)对四氯化碳(CCl4)引起小鼠急性肝损伤的保护作用,建立CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型,将模型小鼠随机分组,每组8只,空白对照组、模型组、药物对照组(联苯双酯)以及MRJPs低、中、高剂量组),检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)等指标的变化,测定肝组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,利用光镜观察肝组织病理形态学变化并测定肝脏中肿瘤坏死因子-α的基因表达量。结果表明:预先灌胃给予MRJPs的小鼠,可以显著抑制CCl4诱导的血清ALT和AST活性水平(P0.01);MRJPs可以显著抑制MDA的生成(P0.01),从而抑制肝脏脂质过氧化;MRJPs可以显著抑制CCl4诱导的小鼠肝脏SOD活性的降低(P0.01),从而增强小鼠肝脏的抗氧化能力;组织病理学检测结果也表明,MRJPs可有效抑制CCl4诱导的急性肝损伤;MRJPs诱导CCl4诱导TNF-α基因水平增加(P0.05),从而调控免疫系统。综上,蜂王浆主蛋白对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。 相似文献
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山羊精子介导转染外源DNA的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
目的：建立山羊精子介导转染外源DNA的方法,并探索精液离心与否与添加异种精清对转染效率的影响.方法：将采集的山羊精液经过离心处理与标记的线形化pEGFP-N1质粒共育转染,分别用免疫组化的方法检测转染效率、PCR和Southern blotting检测转染外源DNA在精子的结合部位和结合率;同时将实验分为3组,分别为鲜精直接转染、离心后转染和离心山羊精液添加猪精清转染,用免疫组化方法检测转染外源DNA效率.结果：精子核后帽区是结合转染外源DNA的主要部位;3种处理的阳性转染率分别为（26.19±3.25）%、（62.04±7.87）%和（17.04±9.34）%;DNaseⅠ消化后的阳性转染率分别为（11.50±5.05）%、（34.00±5.87）%和（10.00±4.24）%.离心组与未离心组和添加猪精清组差异极显著（p〈0.01）.结论：山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力;羊精清和异种精清明显降低精子结合外源基因的效率. 相似文献
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目的:建立山羊精子介导转染外源DNA的方法,并探索精液离心与否与添加异种精清对转染效率的影响.方法:将采集的山羊精液经过离心处理与标记的线形化pEGFP-N1质粒共育转染,分别用免疫组化的方法检测转染效率、PCR和Southern blotting检测转染外源DNA在精子的结合部位和结合率;同时将实验分为3组,分别为鲜精直接转染、离心后转染和离心山羊精液添加猪精清转染,用免疫组化方法检测转染外源DNA效率.结果:精子核后帽区是结合转染外源DNA的主要部位;3种处理的阳性转染率分别为(26.19±3.25)%、(62.04±7.87)%和(17.04±9.34)%;DNaseⅠ消化后的阳性转染率分别为(11.50±5.05)%、(34.00±5.87)%和(10.00±4.24)%.离心组与未离心组和添加猪精清组差异极显著(p＜0.01).结论:山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力;羊精清和异种精清明显降低精子结合外源基因的效率. 相似文献
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实验以山羊精子为对象,研究脂质体介导精子转染外源基因的效率和对生产阳性胚胎的影响.山羊鲜精离心洗涤除去精浆,分别用地高锌(DIG)末端标记的线形外源DNA与精子直接共育(对照组),阳离子脂质体LipofectamineTM-DNA复合体与精子共育(实验组),用免疫组化的方法分别检测它们的转染效率;用成熟卵母细胞与转染外源DNA并已获能的精子行体外受精,PCR方法检测生产阳性胚胎的效率.结果发现添加阳离子脂质体对提高山羊精子结合外源DNA和生产阳性胚胎的效率不显著(p＞0.05),对照组和实验组阳性精子率、DNase I消化后内化率与胚胎PCR阳性率分别为(47.56±3.09)%和(42.54±6.08)%、(26.67±2.40)%和(24.33±2.67)%、24.24%和22.73%,同时还发现添加阳离子脂质体对山羊精子活力和体外受精能力影响不显著(p＞0.05).Abstract： The potential use of liposome in sperm cells as vectors to transfer exogenous DNA via the fertilization of oocytes into the germ line of goat (Capra hircus) was evaluated. Seminal ejaculates collected artificially from healthy adult bucks were pooled together and the washed sperm were incubated with exogenous DIG-labeled linear DNA for 60 min (control group, CG), or with LipofectamineTM-DNA complex (treatment group, TG). The transfection rate of sperm was observed by the in situ hybridization methods. The in virto produced embryos were screened by PCR assay. The results showed that the improvement efficiency of sperm transfection with exogenous DNA by the addition of cationic liposome was nonsignificant, statistically, the positive sperm rate, internalization rate after DNase I treatment and PCR-positive rate of the embryo of CG and TG being (47.56±3.09) % and (42.54±6.08) %, (26.67±2.40) %and (24.33±2.67)% and 24.24% and 22.73%, respectively. The sperm motility and the fertilization rate were not significantly different between CG and TG (P＞0.05), suggesting that DNA transfer into goat sperm was not enhanced very efficiently in the presence of liposome. 相似文献
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