茶叶多酚氧化酶的基因克隆     

骆开明 《山东农业科学》2009,(8):9-12

本试验以嫁接可可茶为材料,提取了高质量的茶树基因组DNA,以纯化的DNA为模板,利用FS和RX引物组合进行PCR扩增,结果扩增出了约1800bp的片段,与预期大小一致。所克隆的PPO基因与其它茶树PPO基因的同源性达到98％,氨基酸序列同源性达到91％,确认为茶叶多酚氧化酶基因。  相似文献   

金针菇启动子的基因克隆   总被引：3，自引：0，他引：3  

骆开明 《亚热带农业研究》2009,5(2)

利用PCR扩增技术,以金针菇菌丝总DNA为模板,扩增出一条长约750 bp的特异性gpd启动子基因条带(命名为gpd-Fv2),并将其连接到载体上,然后转入大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选出阳性质粒。DNA序列与金针菇gpd启动子的同源性为98%。  相似文献   

金针菇启动子的基因克隆     

骆开明 《甘蔗(福建)》2009,(2):137-140

利用PCR扩增技术,以金针菇菌丝总DNA为模板,扩增出一条长约750bp的特异性gpd启动子基因条带（命名为gpd—Fv2）,并将其连接到载体上,然后转入大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选出阳性质粒。DNA序列与金针菇gpd启动子的同源性为98％。  相似文献   

农杆菌介导的双SBE基因RNAi载体对水稻的遗传转化     

骆开明 《安徽农业科学》2008,36(7):2740-2743

[目的]提高水稻中直链淀粉的含量,扩大稻米的利用范围。[方法]以水稻中花11品种为材料,通过农杆菌介导法,侵染水稻幼胚诱导出的愈伤组织,将淀粉分支酶基因SBE1和SBE3同时导入受体愈伤组织,经过一系列的共培养、预分化、分化、生根壮苗后,获得含有转基因的转化植株,并对转化植株进行PCR鉴定。[结果]通过用根癌农杆菌介导法,侵染由水稻幼胚诱导的274粒愈伤组织,经过共培养、筛选,得到177粒抗性愈伤,然后将抗性愈伤预分化、分化得到103株分化苗,生根壮苗后获得49株转基因植株;从49株转基因植株中随机提取34株的基因组DNA,利用PCR技术从基因组DNA中扩增得到了片段大小约为500 bp的潮霉素基因序列。[结论]初步证实转基因植株的真实性,淀粉分支酶基因SBE1+SBE3成功整合进入水稻基因组中。  相似文献   

甜瓜再生体系的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

骆开明 《安徽农业科学》2008,36(11):4419-4423

[目的]建立甜瓜再生体系。[方法]以加格达甜瓜为材料,以MS培养基为基本培养基,根据植物生长调节剂对植物愈伤组织的诱导分化的决定性作用,通过设计不同生长素和细胞分裂素的组合与不同浓度配比,研究建立和优化高效的加格达甜瓜再生体系。[结果]愈伤组织诱导培养基:MS+2,4-D 1.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L,出愈率93%;芽诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L,出愈率76%,出芽率100%;芽的分化培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA0.2 mg/L,分化率为95%;芽的伸长培养基为:MS+6-BAI 0.05 mg/L;根的诱导培养基为:MS+IAA0.2 mg/L。[结论]建立了1套甜瓜的离体再生体系,为利用转基因技术培育出具有抗病虫害、抗逆性等优良性状的甜瓜奠定基础,在理论和实践上均具有重要的意义。  相似文献