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为系统解析甘蓝型油菜基因功能,结合FOX-hunting和Gateway重组技术,以4种激素和4种非生物胁迫处理的甘蓝型油菜幼苗根和叶片及成熟期种子和角果全长cDNA为混样,构建了全长cDNA FOX-hunting过表达文库。经检测,初级文库滴度为3.0×106,库容为1.2×107CFU;次级FOX-hunting过表达文库滴度为2.6×106,库容为1.04×107CFU。次级文库菌液PCR鉴定表明,阳性克隆率为96%,扩增均为250～3000 bp随机分布的单一条带,表明初级文库已较好地重组到pJVC55载体上。农杆菌转化后的克隆测序发现,140个克隆中有12个克隆为非特异扩增。GO富集分析发现剩余128个基因中,除21个基因功能富集于光合作用途径外,其余基因在转录因子和激酶中随机分布,且功能涉及器官发育、物质代谢和胁迫响应等多个方面。上述结果表明,本研究构建的甘蓝型油菜FOX-hunting过表达文库无功能偏向性、多态性丰富、完整性高,可作为油菜功能基因组的研究基础。 相似文献
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以甘蓝型油菜品种中双11为相互嫁接材料，利用正交试验和二次正交回归试验，解析保湿、遮光处理、光照时长、子叶去留、温度、相对空气湿度等环境因素对甘蓝型油菜苗期嫁接的影响；对3个不同时期的幼苗分别采用平接、斜接、插接、侧接和舌接法进行嫁接，综合评价各时期的最佳嫁接方法。结果表明，保湿处理对幼苗期嫁接成功率影响最显著，其次是遮光处理；光照时长和子叶去留影响较小。温度和湿度二次正交回归试验分析表明，缓冲期嫁接伤口愈合最适宜温度为24.4℃，相对空气湿度为88%左右；高空气湿度下，接穗在伤口愈合处极易生长不定根，适当降低空气湿度能抑制不定根的生长。10d的幼苗进行嫁接，5种嫁接方法成功率均达到85%以上；20d的幼苗用舌接法嫁接成功率达到93.3%，而平接和斜接法只有56.7%和46.7%；40d的幼苗在5种嫁接方法下成功率均显著下降，舌接、插接和侧接成功率分别为45%、35%和23.3%，而平接和斜接仅有13.3%和10%。
存、快速繁育，在提高果树和农作物产量、抗逆和抗
病能力以及改良作物品质等方面具有重要的应用价
值［１～４］。嫁接成功率是衡量嫁接效率的重要指标，
不仅受到接穗和砧木亲和力等自身因素影响，同时
也受环境因素和嫁接技术等外界因素控制。拟南芥
（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ）嫁接研究中，Ｔｓｕｋａｙａ等［５］利
用ａｃｌ１（ａｃａｕｌｉｓ１）突变体与野生型进行花序嫁接，采
用了楔形嫁接法将花序作为接穗嫁接到砧木的茎
上。随后Ｒｈｅｅ等［６］对Ｔｓｕｋａｙａ的方法进行改进，在
最佳生长周期进行楔形嫁接成活率可达８７％。拟
南芥根茎嫁接中，Ｔｕｒｎｂｕｌｌ等［８］发现“Ｙ”型嫁接成
功率稍高于水平嫁接和楔形嫁接。Ｈｕａｎｇ和Ｙｕ［９］
等利用针头固定嫁接技术，改善了拟南芥的嫁接环
境，大幅度提高了拟南芥的嫁接效率。Ｍａｒｓｃｈ－
Ｍａｒｔíｎｅｚ［１０］从光照时间、子叶数目等方面系统地分
析了外界因素对嫁接成活率的影响，发现短日照有
利于嫁接植株伤口的愈合，去除子叶更有利于嫁接
体存活；西瓜（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓｌａｎａｔｕｓ）嫁接中也发现了相
似的结果［１１］。可乐果（Ｃｏｌａａｃｕｍｉｎａｔａ）嫁接中发
现，相同时期的接穗嫁接到不同苗龄期砧木上，低苗
龄砧木成功率高于高苗龄砧木［１２］。
油菜嫁接研究中，Ｆｉｌｅｋ等［１３］用插接法把未春
化的接穗嫁接到春化的砧木上，电流刺激试验记录
开花百分比，结果发现极性电流能促进短日照下的
开花。官春云等［１４］用插接法对不同油菜品种进行
嫁接，嫁接成功率达到５０％以上。Ｏｓｔｅｎｄｏｒｐ等［１５］
用平接法对生长６ｄ的甘蓝型油菜幼苗嫁接发现，除
去子叶的幼苗在长日照下有更高的成功率。耿建明
等［１６］对不同品种甘蓝型油菜幼苗嫁接发现，在空气
湿度为９０％的保湿遮光处理下，嫁接苗具有较高的
成活率。在不同甘蓝型油菜基因型硼效率差异机制
研究中，郭丽丽对传统的插接法进行改进，发现改进
后的嫁接方法在幼苗期嫁接成功率明显提高［１７］。
总结前人研究发现，环境因素和嫁接方法对嫁
接 相似文献
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便携式温室环境参数测量仪的研制 总被引：2，自引：0，他引：2
介绍了一种实用的便携式温室环境参数测量仪的设计与实现，该测量仪实现了对温度，湿度，光照和CO2浓度的测量，特别是实现了CO2浓度的低成本测量，硬件电路同数据采集模块，CPU数据存储模块，键盘输入模块，显示输出模块等组成，单片机软件程序主要是完成测量，运算，模糊处理，显示等功能，采用模块化结构设计，利用C51语言编程实现。 相似文献
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