利用psbA-trnH片段鉴定罗汉果和山药破壁草本     

郑夏生  赖智填  成金乐 《安徽农业科学》2016,(6):163-166

[目的]解决罗汉果和山药破璧草本DNA提取困难,而无法用分子生物学鉴定的问题。[方法]通过比较常用DNA提取试剂盒法和改良的CTAB法,利用psbA-trnH片段鉴定罗汉果和山药破壁草本。[结果]改良的CTAB法可从罗汉果和山药的药材、破壁粉末和破壁草本3种形态中成功地提取出基因组DNA,并可进一步利用DNA条形码的psbA-trnH片段进行分子鉴定。[结论]该方法稳定可行,可用于罗汉果和山药的药材、破壁粉末和破壁草本的DNA条形码鉴别。  相似文献   

基于ITS2条形码的南药巴戟天真伪鉴别   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄琼林  郑夏生  蔡春 《热带作物学报》2014,35(8):1571-1576

本研究旨在建立基于ITS2条形码的巴戟天及其混伪品的真伪鉴别方法。采用试剂盒提取巴戟天植物样品的总DNA,以一对通用引物对其ITS2条形码进行PCR扩增并测序;从Genbank数据库获取巴戟天及其混伪品ITS2序列。采用DNAMAN、ClustalX软件拼接比对序列,以及利用MEGA5.1软件构建NJ树。获得的22条ITS2序列的长度范围为224~244 bp,GC含量范围为59.8%~70.1%。巴戟天与8种混伪品的ITS2序列存在155处变异,种间K2P遗传距离远大于种内K2P遗传距离。基于ITS2条形码的NJ聚类树能直观地区分巴戟天及其混伪品。因此,ITS2条形码适用于南药巴戟天及其混伪品的鉴别,可为其基原研究提供重要的分子鉴定证据。  相似文献   

岗梅实时荧光定量PCR内参基因的筛选     

郑夏生  叶国兵  纪晓宇  温羚玲  徐晖  詹若挺  陈蔚文 《热带作物学报》2015,36(6):1119-1124

为筛选适用于岗梅实时荧光定量PCR的内参基因。应用实时荧光定量PCR技术,分析18S rRNA（18S）、Actin（ACT）、α-tubulin（TUA）、β-tubulin（TUB）、Cyclophili（CYP）、Elongation factor 1-α（EF-1α）和Polyubiquitin（UBQ）共7个看家基因在岗梅的8个不同组织部位中的表达情况,并利用GeNorm、NormFinder和BestKeeper共3个软件对每个看家基因的表达稳定性进行评价。3个软件的分析结果均表明：18S、ACT和TUA看家基因的稳定性和相关性均较好,可在这3个看家基因中选择1个或以18S-ACT、18S-TUA组合作为岗梅基因研究的内参基因。  相似文献