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为建立一种更加准确、敏感的鸭疫里默氏杆菌检测方法,根据鸭疫里默氏杆菌16S rRNA基因序列设计2对巢式PCR引物,在完成最佳反应条件筛选、特异性、敏感性、重复性试验的基础上,建立巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR对1、2、10、X型鸭疫里默氏杆菌的16S rRNA都能扩增出特异性片段,而对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门菌、鸭源金黄色葡萄球菌的基因组不能扩增出特异性片段,DNA最小检测量为0.392 fg/μL,是常规PCR的1 000倍.该巢式PCR方法具有快速、敏感、特异、通用的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定. 相似文献
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从猪睾丸中提取RNA后,采用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）方法获得PHGPxcDNA。扩增的目的基因片段经琼脂糖凝胶电泳回收,与pMD18-T载体连接,转入E．coli DH5α中筛选鉴定重组子。将质粒经酶切鉴定后,把酶切下的目的基因cDNA进一步克隆到真核表达载体pGAPZ旺A中,经PCR及序列鉴定,证实插入载... 相似文献
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为明确珠三角地区鸭疫里默菌的主要生物学特性,对从珠三角地区分离到的87株鸭疫里默菌进行生化试验、玻片凝集试验、药敏试验、致病性检测及16 S rRNA基因测序,以比较相互间的生物学特性及其同源性.结果表明,分离株的生化特性基本一致;血清型以2型为主,占65.5％,其次是1型,占14.9％,此外还有16株未定型,占18.4％;代表株对雏鸭具有很强的致病性,对头孢类药物（头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢唑林）非常敏感,而对常用抗菌药物（青霉素、氨苄西林、氯霉素、链霉素、卡那霉素）普遍耐药;本试验检测的19株代表菌的16 S rRNA基因序列的同源性较高,16 S rRNA基因与菌株的血清型和致病性无直接关系. 相似文献
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