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镉(Cd)是蓄积性和毒性较强的生物非必需重金属元素之一,会对水生生物造成较大的危害。为更好地了解镉对日本沼虾的分子毒性作用,为水环境镉污染的生态风险预警和评估提供生物标志物,克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponenes)桩蛋白(paxillin)基因MnPXN,并检测了镉胁迫对其表达的影响。MnPXN基因全长为3 655 bp,包含1 491 bp的编码区,编码496个氨基酸;MnPXN蛋白具有6个低复杂区域和3个保守的LIM结构域,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)聚成一支,与家蚕(Bombyx mori)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)等昆虫的亲缘关系较近,与线虫(Nematoda)亲缘关系最远。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,MnPXN在日本沼虾的肝胰腺、胃、鳃中表达水平较高,在心脏和肌肉中表达水平较低。在0.242 7 mg·L-1 CdCl2中暴露24 h,肝胰腺中MnPXN基因表达水平较对照组均显著升高,0.020 0 mg·L-1 ... 相似文献
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为研究趋化因子CXCL10的表达特征及其对外源病原微生物的响应,该研究以中华鳖为实验对象,利用生物信息学分析CXCL10蛋白的分子特征及系统进化,通过荧光定量PCR技术检测该基因在健康中华鳖各组织中的表达分布及其在革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和革兰氏阴性菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)胁迫下mRNA的表达规律。结果显示该蛋白分子量为10.89 ku,等电点为9.62,存在信号肽和磷酸化位点,单链包含1个N端的loop区、1个α螺旋和3个反向平行β折叠;该基因在健康中华鳖的心脏和肝脏中表达量最高,在血液中表达量最低;两种细菌的刺激能促使中华鳖组织器官中CXCL10及炎症相关因子TNF-ɑ、IL-1βmRNA表达量的显著上调,表明CXCL10基因能够参与中华鳖机体抗菌免疫过程。同时本实验构建pET-32a-CXCL10重组质粒,通过原核表达系统体外得到分子量约为29.7 ku的CXCL10融合蛋白,为进一步探究该蛋白的体外抑菌功能奠定基础。 相似文献
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