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急性病毒性坏死病毒引物酶表达及酶学活性分析 总被引：1，自引：1，他引：0
根据急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)ORF 024序列设计引物,以AVNV的DNA为模板进行扩增AVNV引物酶(primase)基因,同时构建表达质粒pET32a-prim,并转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE检测显示诱导表达两条蛋白条带,其中分子量为60 ku的蛋白条带与预期表达蛋白条带大小一致,另一蛋白条带分子量约为55 ku,经Western-blotting及质谱分析鉴定分子量60 ku的蛋白条带为AVNV-引物酶,而表达出的55 ku蛋白条带存在部分引物酶多肽片段。RNA结合荧光染料Pico-Green在30 min内荧光强度比较稳定,从而确定30 min为进行AVNV引物酶活性分析的最佳终止反应时间,并在引物合成实验中观察到30 min内引物酶活性较高。当使用多聚胞嘧啶寡核苷酸poly(d C)为模板时,重组引物酶能特异性催化底物GTP。0.1 mmol/L Zn2+可显著增强引物酶活性,而1mmol/L Mn2+和EDTA能抑制引物酶活性。 相似文献
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【目的】为绢毛匍匐委陵菜(Potentilla reptans var. sericophylla)在公园绿地不同环境中的科学应用及花期养护管理提供借鉴。【方法】调查公园绿地不同微生境(林下、林缘、旷地、凹地)的空气、 光照、土壤等环境因子特征及绢毛匍匐委陵菜花期生长发育状况，运用多元回归分析法，分析主要环境因子对绢毛匍匐委陵菜花期生长发育特征的影响。【结果】1)不同微生境类型中绢毛匍匐委陵菜花期的地上生物量、匍匐茎平均长度有显著差异(P＜0. 05)，匍匐茎数量有极显著差异(P＜0. 01)，土壤含水率对匍匐茎发生有一定影响，凹地微生境 20% 的土壤含水率更适于绢毛匍匐委陵菜花期匍匐茎的发生与伸长。2)不同微生境下的花量、花期有极显著差异(P＜0. 01)，花量、花期均与空气湿度、相对光照强度呈正相关关系，在空气湿度为 28. 19%，相对光照强度为 100% 的旷地生境中，绢毛匍匐委陵菜花量最多且花期也最长。3)株高和盖度与空气湿度之间有着极显著的正相关关系(P＜0. 01)，空气湿度为 28. 35% 的林缘微生境中绢毛匍匐委陵菜花期株高、盖度最更。【结论】光照条件更好的旷地生境可以有效维持绢毛匍匐委陵菜的花期并提升花量，坡地微地生境绢毛匍匐委陵菜匍匐茎最多且长， 林缘微生境创造的较湿润的空气条件有助于绢毛匍匐委陵菜增高和覆盖地表。 相似文献
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