PGF2αeCG及hCG 3种生殖激素联用对母犬发情、卵泡发育及胚胎着床的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

谭建华  安铁洙  刘珠果  万忠海  周虚 《中国兽医学报》2002,22(4):394-396

给休情期性成熟母犬肌注 PGF2α(0 .5 m g/ kg) ,2 4 h后肌注 e CG(5 0 IU/ kg) ,再经 12 0 h后肌注 h CG(2 0 U/ kg) ,诱导其发情。将诱导发情的母犬与公犬交配 ,于交配后 16 d,摘取卵巢、子宫 ,观察其卵泡发育和胚胎着床情况。结果表明 ,药物处理可明显促使母犬提前结束休情期而进入发情期 (9/ 10 ) ,促进卵巢内卵泡发育 (P<0 .0 1) ,并使更多的胚胎着床 ,每只母犬子宫胚胎着床点为 (17.4± 2 .2 )个 ,提示 3种生殖激素联合应用可提高母犬繁殖率  相似文献   

5株氟罗沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的品质评价     

谭成成  刘艳霞  李晓艳  万忠海 《勤云标准版测试》2009,29(24)

摘 要：通过对5株杂交瘤细胞株分泌稳定性、抗体亚型、亲和力、特异性等方面的测定,表明其染色体众数为87-90条,具有众数的细胞所占比例为81-84%,单抗亚型均为IgG1型,腹水单抗的亲和常数为108～109M－1,氟罗沙星单抗与诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、链霉素、庆大霉素、卡那霉素的交叉反应试验表明。所制备的抗氟罗沙星单抗对氟喹诺酮类药物有较高的交叉反应率。与链霉素、庆大霉素、卡那霉素无交叉反应。  相似文献   

野生黑斑蛙皮肤抗菌肽快速分离、纯化方法的建立     

郝镯  王承宇  孟轲音  李楠  李筱鑫  万忠海  刘全  何扬  李吉平 《黑龙江畜牧兽医》2018,(19)

正抗菌肽(AMPs)也被称为抗微生物肽,是分子质量比较小,可以抗细菌、病毒及原虫等微生物的一类小肽[1-3],其来源广泛,且具有耐热、耐酸碱及对微生物重复使用不产生耐药性等特点[4-5]。由于其特殊的性质和生物学活性,已成为新型抗菌药物的研究热点。将抗菌肽从成分复杂的样品中分离出来是困扰此类药物研究的关键问题之一。传统的分离方法复杂,采用蛋白质分离纯化的方法,如凝胶过滤色谱法[6-7]、离子交换色谱法[8-9]、制备型反相色谱法[10]等  相似文献   

犬瘟热病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用     

郝镯  李楠  张珊珊  李吉平  何洪彬  孟轲音  李筱鑫  万忠海  穆玉堂  李忠义  田多  李晓娜  王承宇 《黑龙江畜牧兽医》2019,(17)

为了建立一种新型、稳定、可普遍应用的诊断犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的方法,试验采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合的方法,根据CDV N基因序列中同源性相对较高的保守区设计一套标有生物素(biotin)的特异性引物,结合异硫氰酸(FITC)荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMPLFD检测方法,对该方法的反应条件和反应体系进行优化,同时分析敏感性及特异性,最后检测临床应用情况。结果表明:试验成功构建CDV RT-LAMP-LFD方法,此方法的最佳反应条件为60℃反应60 min;最佳的反应体系为镁离子浓度12 mmol/L,甜菜碱浓度0. 2 mmol/L,Bst DNA聚合酶活性8 U,AMV酶活性5 U,外引物与环引物比例1∶2;最低检测下限为1×10~2个拷贝/m L,能够特异地检测出CDV的存在,犬细小病毒(CPV)等其他病毒均为阴性,可以检测出病犬口鼻腔黏液中的CDV。说明试验建立的CDV RT-LAMP-LFD检测方法特异性强,敏感性高,操作简单,可广泛应用。  相似文献   

重组PEA受体结合区蛋白的免疫活性     

万忠海  金爱军  谭建华  江禹  刘晓明  朱平 《中国兽医学报》2004,24(1):82-84

为了观察重组绿脓杆菌外毒素 A(PEA)受体结合区蛋白在不同动物体内的免疫效果 ,将该蛋白纯化后免疫了小鼠、家兔、山羊等动物。对小鼠进行了攻毒实验 ,通过 EL ISA方法检测了家兔、山羊血清中抗体的消长规律。结果对小鼠的保护情况为 :最后 1次免疫后 14 d小鼠对 3倍 L D50 的 PEA攻毒保护率为 10 0 % ,2 1d保护率为 5 0 % ,2 8d后无保护效果。家兔和山羊免疫后 7～ 14 d达到峰值 ,2 1d后逐渐降低 ,2 8～ 35 d后降至免疫前水平  相似文献   

5株氟罗沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的品质评价     

谭成成  刘艳霞  李晓艳  万忠海 《中国农学通报》2009,25(24):96-101

摘 要：通过对5株杂交瘤细胞株分泌稳定性、抗体亚型、亲和力、特异性等方面的测定,表明其染色体众数为87-90条,具有众数的细胞所占比例为81-84%,单抗亚型均为IgG1型,腹水单抗的亲和常数为108～109M－1,氟罗沙星单抗与诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、链霉素、庆大霉素、卡那霉素的交叉反应试验表明。所制备的抗氟罗沙星单抗对氟喹诺酮类药物有较高的交叉反应率。与链霉素、庆大霉素、卡那霉素无交叉反应。  相似文献   

免疫亲和层析纯化EGF-PE40   总被引：2，自引：0，他引：2  

董冰  张国利  万忠海  吴广谋  岳玉环  朱平 《中国兽医学报》2003,23(3):274-276

用PEG融合法建立了分泌抗EGF-PE40抗体的杂交瘤细胞株,并筛选了一杂交瘤细胞株D7.用此细胞株制备了高抗体含量的腹水,用辛酸-硫酸胺沉淀法纯化了抗体IgG,用ELISA法测定其与EGF-PE40的亲和常数2.24×109L/mol,并鉴定其亚类为IgG1.将纯化后的单抗IgG与CNBr活化的Sepharose 4B偶联,并用免疫亲和层析的方法纯化粗提物中的EGF-PE40,得到了大于80%的纯化率,且产物显示了良好的生物学活性,这为EGF-PE40的进一步纯化和大量生产提供了可能.  相似文献   

母马生长激素细胞和催乳激素细胞的形态计测学研究     

谭建华  安铁洙  岳玉环  万忠海  李阳芳  佐佐木文彦 《动物医学进展》2001,22(3):68-70

利用免疫组织化学和形态计测学的方法 ,观察了 1 8匹成熟雌性蒙古马的脑垂体前叶生长激素细胞和催乳激素细胞的数量和面积 ,同时利用放射免疫分析方法检测了这两种激素的血浆水平。结果表明 ,每个马脑垂体前叶中 ,生长激素细胞的平均数量为 6 .42× 1 8,每个细胞的平均面积为 82 .40μm2 ;催乳激素细胞的平均数量为 6 .0 7× 1 0 8,每个细胞的平均面积为 47.31μm2 。生长激素的血浆含量平均为 2 .84ng/ m L,但个体差异较大 ,变异系数高达 78.5 % ,催乳激素的血浆含量平均为 7.2 6 ng/ m L。本研究结果揭示 :母马脑垂体生长激素细胞和催乳激素细胞的数量和面积并不是决定母马这两种激素血中浓度的唯一重要因素 ;生长激素血中浓度上的个体差异 ,可能与其搏动性分泌形式有关  相似文献   

GnRH脉冲对体外原代培养大鼠GTH细胞中FSHβ mRNA表达水平的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

王新  谭建华  赖小平  万忠海  韦旭斌 《动物医学进展》2011,32(4):55-58

为了从分子水平阐述不同脉冲频率促性腺激素释放激素(GnRH)对促性腺激素(GTH)分泌促卵泡素(FSH)的影响,采用细胞体外培养技术结合荧光定量PCR技术,研究体外培养大鼠原代垂体细胞在不同脉冲频率GnRH刺激下,细胞FSHβ mRNA的变化.在相同振幅条件下,低频刺激(120 min间隔)时,FSHβ mRNA表达水...  相似文献   

牛布鲁菌O链A抗原的提纯鉴定及种特异性单克隆抗体的研制   总被引：1，自引：0，他引：1  

梅建军  王兴龙  万忠海  李晓燕  马云志  刘锴  王学理  任林柱 《中国兽医学报》2008,28(12)

应用热酚法提纯牛布鲁菌544A的O链,经Sephades G-50纯化后,琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS聚丙烯酰胺凝胶进行电泳鉴定,用牛布鲁菌544A株全菌体免疫BALB/c小鼠,用纯化的O链筛选出4株针对O链表面A抗原的种特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株4B8、1C9、1G9和1E2,4株单克隆抗体均不与羊布鲁菌16 M、大肠杆菌O157、小肠结肠炎耶尔森菌O9、鼠伤寒沙门菌、放线杆菌发生交叉反应,具有高特异性,其中4B8的亲和常数达到了8.99×108M-1,适合用于鉴定牛种布鲁菌的研究。  相似文献