整合质粒对苏云金芽胞杆菌转化的研究     

乐超银  喻子牛 《华中农业大学学报》2001,20(4):363-364

苏云金芽胞杆菌 (Ｂｔ)是一种革兰氏阳性菌 ,可产生具有杀虫活性的伴胞晶体蛋白 ,作为一种全球性生物农药广泛应用于农林害虫的防治。电脉冲法是细菌质粒转化中比较常用的一种方法 ,特别是在革兰氏阳性菌以及很多用常规方法不能转化的细胞 ,用电脉冲法可以成功转化[1] 。所以 ,电脉冲法目前已作为一种高效、简便和省时的方法 ,被用于Ｂｔ的遗传改良中。笔者所在实验室在构建Ｂｔ工程菌的过程中 ,发现按照常规的电转化方法 (用对数生长中期细胞制备感受态 ,ＯＤ660约为 2 0 0～ 2 2 0 ,电压为 6.2 5～9ｋＶ ｃｍ ,电阻为 2 0 0Ω ,电容为 2 5…  相似文献   

盐城市现代农业示范园区的成功实践及发展对策思考     

乐超 《大麦与谷类科学》2012,(1):1-3

2007年，盐城市立足农业“大而不强”的基本情况，在深入调研论证的基础上，坚持高起点、多层面、树特色、重效益，采取“市、区共建”的模式，在盐都区郭猛镇建设盐城现代农业示范园区。2008年以后，盐城市委、市政府把现代农业示范园区作为建设现代农业的“三大载体”之一，在全市9个县（市、区）和50个重点镇全面推进，努力打造现代农业发展引擎。  相似文献   

魔芋内生拮抗菌的筛选及鉴定     

程海丽  潘虹  陈磊  乐超银 《河南农业科学》2014,(3):81-84,88

为了从魔芋组织中筛选得到有效抑制魔芋软腐病菌的内生拮抗菌,采用组织块法从魔芋块茎中分离到15株内生细菌,通过菌株发酵上清液抑菌试验筛选拮抗菌株,发现其中5株对魔芋软腐病具有拮抗作用,占所筛内生菌的33%,BS-4、5、8的抑菌圈较大,直径在14~16mm。魔芋块茎感病试验发现,抑菌活性较高的BS-8菌株发酵上清液能在一定程度上抑制魔芋块茎感病,经生理生化和16SrRNA基因序列分析鉴定,证实BS-8菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。BS-8菌株对魔芋软腐病菌具有很好的拮抗性,可作为一种新的植物生防制剂或工程菌进行更深一步的研究。  相似文献   

兰花香味相关基因的RAPD分子标记   总被引：9，自引：0，他引：9  

王健  乐超银  谢伟  梁薇  林直  郭政宏 《江苏农业科学》2006,(5):78-79

采用简化的CTAB法提取了16种有香和无香春兰的基因组DNA,并以此为模板,采用BA系列的100条随机引物,进行RAPD分析,其中引物BA0088(G08)对香花春兰的扩增产物中具有一条特异性的370 bp的条带,带型清晰,重复性较好,为进一步确定与香味成分相关基因连锁的RAPD标记打下了基础。  相似文献   

农杆菌介导的花魔芋遗传转化体系的优化     

陈磊  郭政宏  程海丽  乐超银 《安徽农业科学》2015,(5):21-24

[目的]探讨魔芋愈伤组织培养基、不同转化条件(菌液浓度、侵染时间、预培养时间及共培养时间)及转化植株的筛选条件(抗生素浓度和乙酰丁香酮(AS)浓度)等因素对转化效率的影响。[方法]采用卡那霉素抗性基因为选择标记,对农杆菌介导的花魔芋遗传转化体系进行优化。[结果]在预培养2 d,用OD600为0.6的菌液侵染30 min、共培养3 d,卡那霉素100 mg/L,羧苄青霉素250 mg/L,AS浓度100μmol/L的条件下能有效提高转化效率。再生花魔芋植株经GUS染色及PCR检测,结果表明外源目的基因已经整合到花魔芋基因组中。[结论]为魔芋抗病品种的转基因培育,丰富其种质资源,寻找抗病新途径提供理论依据和试验基础。  相似文献   

双孢蘑菇细胞抽提物生产工艺初探     

邵伟  乐超银  唐明 《食用菌》2008,30(6):48-49

以双孢菇菇柄和残次菇为原料,在50-55℃、pH6．0～6．5和助溶剂NaCl存在的条件下,经过8h的保温自溶作用,将双孢菇细胞内的可溶性成分渗析出来,与蘑菇杀青水调配后,通过浓缩及干燥可得双孢蘑菇细胞抽提物。该产品为黄褐色粉末,具有双孢蘑菇所特有的气味,口味鲜美,总氮含量每百克达到6．4g、氨基酸态氮可达2．1g。  相似文献   

兰属品种的RAPD鉴定和亲缘关系分析   总被引：15，自引：2，他引：13  

谢伟  乐超银  林直  程凡  何正权  姚伟 《江苏农业学报》2005,21(4):369-373

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对兰属7个种的9个品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。从60个随机引物中,筛选出6个对9个供试兰花品种均能产生多态性谱带的引物。在这6个引物所检测的64个位点中,61个位点为多态性位点,占总位点数的95.3%。聚类分析结果表明,不同兰花品种之间存在明显的遗传差异,而且根据RAPD标记进行的兰花品种聚类结果与传统的形态学分类结果基本一致,只是莲瓣兰与建兰组的分类地位有一些差异。  相似文献   

5种中国兰花RAPD反应条件的优化   总被引：9，自引：0，他引：9  

谢伟  乐超银  周艳  林直  何正权 《热带农业科学》2005,25(4):19-23

以5种中国兰花为材料,提取了其叶片基因组DNA;以春兰叶片的基因组DNA为模板,优化了RAPD的反应条件.试验结果表明：春兰基因组DNA的最适扩增条件为,25μL体系,Taq酶0.08 U/μL,dNTP 240μmol/L,Mg^2＋1.2mmol/L,随机引物0.5μmol/L,模板DNA6.2 ng/μL;反应因子低于最适值,会导致扩增带数减少甚至无带;但若高于最适值,则会出现带的弥散或缺失.  相似文献   

魔芋软腐病致病机理及其生物防治   总被引：2，自引：1，他引：1  

王健  乐超银  郭政宏  刘海军  李金鞠 《安徽农业科学》2009,37(30):14746-14748

[目的]报道国内外学者关于魔芋软腐病生物防治的研究成果。[方法]通过近几年国内外文献调研,综述国内外学者在致病机理和生物防治方面的研究进展,并就今后魔芋软腐病防治提出几点设想。[结果]在对软腐欧文氏菌病原菌致病机理的深入研究中,明确了软腐欧文氏菌的群体调节系统,即细菌可根据特定信号分子浓度监测周围环境中自身或其他细菌的数量变化,能启动菌体中相关基因的表达来适应环境中的变化;明确欧文氏菌有一系列分泌系统,系统Ⅰ将蛋白酶从细胞质分泌到胞外空间一步完成,系统Ⅱ可分2步分泌果胶酶和纤维素酶,在致病中起重要作用;果胶酶是致病过程中最重要的酶。近年来生物防治魔芋软腐病初见成效,主要是利用生防细菌、生防真菌和植物活性物质以及利用植物基因工程防治魔芋软腐病。[结论]该研究为软腐病的有效防治提供了新的思路和手段。  相似文献   

魔芋细胞悬浮培养生产葡甘露聚糖的研究     

王健  郭政宏  刘海军  李金鞠  乐超银 《安徽农业科学》2010,38(27):14836-14838

[目的]对影响魔芋细胞悬浮培养及其次生代谢物葡甘露聚糖产生的主要影响因子进行研究。[方法]利用3,5-二硝基水杨酸测定葡甘露聚糖含量。[结果]在魔芋细胞悬浮液体培养葡甘露聚糖的过程中,采用MS培养基为基本培养基,pH值为6.0时有利于葡甘露聚糖的合成,25g/L乳糖可作为最适碳源;2,4-D在1.0mg/L时葡甘聚糖的积累效果明显;细胞分裂素6-BA使葡甘露聚糖积累明显高于KT,且1.5mg/L时葡甘露聚糖积累量较高,培养15d左右葡甘露聚糖含量达到最大。[结论]MS＋2,4-D1.0mg/L＋6-BA1.5mg/L＋乳糖25g/L,pH6.0,为魔芋细胞悬浮培养生产葡甘聚糖的较优培养基。  相似文献