猪圆环病毒2型SD2分离株ORF3基因转录分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

丁鹏  李俊  于周  程凯慧  吴家强  王金宝 《中国畜牧兽医》2009,36(8)

对PCV2 SD2株(DQ478947)进行了序列分析发现,其含有11个开放阅读框,与以往分离株开放阅读框有较大差异.根据GenBank发表的PCV2序列设计特异性引物,扩增ORF3基因,预计扩增片段大小为209 bp.分别在接毒后12、24、36、48 h,用Trizol法自病毒细胞裂解液提取总RNA,然后用DNase I处理,除去残留的病毒DNA,利用醋酸纤维素分离mR-NA,用上述引物进行RT-PCR扩增.在接毒24 h后扩增出的目的片段大小与预计扩增片段大小相符合,测序结果表明扩增片段与PCV2 SD2(DQ478947)ORF3基因序列相符.由此证实,PCV2山东分离株ORF3基因可在接毒24 h后于转录水平表达,为ORF3基因的深入研究打下了基础.  相似文献   

猪圆环病毒2型毒株的分离鉴定   总被引：4，自引：0，他引：4  

于周  李俊  程凯慧  时建立  吴家强  温建新  王金宝 《中国兽医杂志》2009,45(1)

猪圆环病毒2型(PCV2)可引起断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、繁殖障碍等相关疾病[1],其中以PMWS最为严重.该病主要侵害6～12周龄仔猪,引起渐进性消瘦、呼吸困难、腹泻和黄疸等,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.  相似文献   

抗新城疫病毒HN蛋白单抗可变区基因的克隆与序列分析   总被引：2，自引：2，他引：0  

路希山  黄艳艳  胡北侠  李士娟  于周  李相钊  王金宝  张秀美 《中国畜牧兽医》2008,35(5):25-27

提取抗新城疫HN蛋白单克隆抗体C3-B7杂交瘤细胞总RNA,进行RT-PCR,扩增出轻重链可变区基因。凝胶回收纯化后与pMD-18T载体连接,重组载体转化于宿主菌DH5α,筛选出阳性重组子,菌液PCR鉴定后进行测序。结果显示,VH基因全长357 bp,编码119个氨基酸;VL基因全长332 bp,编码110个氨基酸。这为单链抗体的构建及表达奠定了基础。  相似文献   

猪圆环病毒2型SD2分离株ORF3基因转录分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

丁鹏  李俊  于周  程凯慧  吴家强  王金宝 《中国畜牧兽医》2009,36(8):128-130

对PCV2 SD2株（DQ478947）进行了序列分析发现,其含有11个开放阅读框,与以往分离株开放阅读框有较大差异。根据GenBank发表的PCV2序列设计特异性引物,扩增ORF 3基因,预计扩增片段大小为209 bp。分别在接毒后12、24、36、48 h,用Trizol法自病毒细胞裂解液提取总RNA,然后用DNase I处理,除去残留的病毒DNA,利用醋酸纤维素分离mRNA,用上述引物进行RT-PCR扩增。在接毒24 h后扩增出的目的片段大小与预计扩增片段大小相符合,测序结果表明扩增片段与PCV2 SD2（DQ478947）ORF3基因序列相符。由此证实,PCV2山东分离株ORF3基因可在接毒24 h后于转录水平表达,为ORF3基因的深入研究打下了基础。  相似文献